摘要：该论文通过对海带配子体保存中污染菌的分离纯化及药敏试验,分离获得一些主要的污染菌群并探索有效的抗生素及使用浓度。将污染的样本涂板,待长出菌落后,反复3区划线,分出单个菌落,得到纯培养。该试验分出2株真菌(粗丝和细丝)和1株细菌,然后再接种于液体培养基增菌,收集细菌或真菌用相应的方法提取DNA。真菌用18 s rDNA通用引物,细菌用16 s rDNA通用引物进行PCR反应,最后将PCR反应产物送基因公司测序,将测序结果在GeneBank中比对。结果表明:粗丝18 s rDNA序列与Fusarium proliferatum同源性最高,为100%;细丝18 s r DNA序列与Nectria mauritiicola同源性最高,为99%;细菌16 s rDNA序列与Halomonas sp.同源性最高,为99%。通过药敏试验观察发现粗丝的制霉菌素敏感抑菌圈直径为13~15 mm;细丝的先锋霉素敏感抑菌圈直径为14~16 mm;细菌的盐酸青霉素较敏感,其抑菌圈为15~17 mm。

摘要：利用12C重离子束对东方海洋种质库保存的8个海带配子体克隆系进行3次辐射试验,辐射剂量分别为10、20、40、50、60、80、120、160、200和240 Gy。结果表明,使海带配子体克隆细胞发生变化的最低辐射剂量为60 Gy,随着剂量的增大,细胞死亡增多,240 Gy辐射剂量下仅有一个克隆系存活;80 Gy辐射剂量下细胞存活率约为50%~60%;不同海带配子体克隆系对重离子辐射的耐受度稍有差别;雄配子体比雌配子体耐受力稍强。

摘要：为确定海带(Saccharina japonica)配子体紫外线辐射的适合剂量范围,利用紫外线对东方海洋种质库保存的2个海带配子体克隆系进行辐射试验。通过三次预试验,辐射条件设置为:辐射距离12 cm,辐射时间分别为10、20、30、40、50、60、90、120 s。结果显示:辐射时间10、20 s配子体细胞未发生明显变化,但受辐射影响,克隆约2个月的时间不生长;辐射时间30 s细胞存活率约为50%~55%;随着辐射时间的增加,细胞死亡增多;辐射时间120 s下,两个克隆系只有极个别细胞存活。在辐射距离12 cm时,辐射时间10~120 s作用范围内,雄配子体耐受力明显高于雌配子体。

摘要：为探明铁盐对不同品种(系)以及相同品种(系)在不同生长条件下海带雌配子体的影响,通过添加不同质量浓度的Fe^(3+),对培养在低温弱光[(10.0±1.0)℃、2μmol/(m^(2)·s),L]和高温强光[(15.0±1.0)℃、80μmol/(m^(2)·s),H]条件下的“901”、韩国海带和“连杂1号”3个品种(系)海带雌配子体的生长发育进行了观察。试验设置0、0.5、1.0、1.5 mg/L 4个Fe^(3+)质量浓度,光照周期为10 L∶14 D,试验持续1个月。结果表明,铁盐能够促使“901”雌配子体生长与成熟、排卵进行孤雌生殖,Fe^(3+)质量浓度越高,配子体排卵的比率越高,“901”(L)配子体排卵的比率低于“901”(H)。韩国海带和“连杂1号”很少有雌配子体细胞排卵,Fe^(3+)质量浓度越高,其营养生长越旺盛。韩国海带(L)的相对生长率低于韩国海带(H),“连杂1号”(L)的相对生长率略低于“连杂1号”(H)。试验中所生成的孢子体均为畸形,且最后均死亡。

摘要：针对海带(Saccharina japonica)配子体保存过程中严重污染材料的分离纯化进行研究。(1)液相培养分离纯化法:将克隆材料经超声波细胞粉碎仪打碎后重新附着到90 mm培养皿中,利用微毛细吸管在显微镜下分离出状态好且无菌丝附着的细胞段,继续保存。(2)固相培养分离纯化法:将克隆材料4000 r/min离心5~10 min,弃上清,加灭菌PESI培养液重新悬浮藻液,利用5 mL无菌注射器吸取2 mL粉碎后的配子体细胞,逐点注射入固相平板上,接种后利用Parafilm封口膜密封培养皿,平板培养约60~120 d后观察,将未长出菌落且藻斑直径达2 mm的克隆团挑出,然后在PESI液体培养基中复苏继续保存。

摘要：通过设置不同的培养条件,检验温度、光照强度和光照周期对裙带菜雌配子体生长的影响。第一步设置3个温度条件(12℃、16℃、20℃)和5个光照强度条件(1 000、1 500、2 000、2 500、3 000lx)进行全析因方差设计,得出最适温度条件和光照强度;第二步,在最适温度条件下,设置2个光照周期(24h持续光照和光暗周期D∶L=12∶12)和不同光照强度,检验不同光照强度条件和光照周期对配子体生长的影响。在以上实验的基础上,根据最适温度条件和光照周期,设置不同光照强度检验其对配子体鲜重量生长的影响。实验结果显示:裙带菜雌配子体最适宜的在温度为16℃,光照强度为2 500lx,周期为24h持续光照。

摘要：跟踪观察了温度和光照强度双因子对多肋藻雌配子体生长的影响,旨在探明其适宜的种质保存与扩增培养的温光条件。试验设置3个温度,分别为10、15和20℃,每个温度下设5个光照强度,分别为10、20、40、60和80μmol/(m^(2)·s),实验进行了4个月。结果表明,配子体在10℃,光强≤10μmol/(m^(2)·s)时适宜种质保存,15~20℃、20μmol/(m^(2)·s)时适宜短期扩增培养,15℃、20μmol/(m^(2)·s)时适宜长期扩增培养。

摘要：海带是一种自然分布于北太平洋和北大西洋的冷水性大型经济食用海藻,自1927年从日本海域引入我国海域[1-2]之后,渐渐适应了我国的海洋环境条件,并发展成为重要的人工栽培经济海藻[3-6]。目前,我国的辽宁省、山东省、江苏省、浙江省、福建省和广东北部等沿海地区,为主要的海带养殖区域。

摘要：为了建立一个重现性好、稳定性高,适用于海带属ISSR遗传分析的PCR反应体系,从海带属配子体材料中提取基因组DNA作为模板,应用正交设计试验对反应体系中各因子的不同浓度进行组合优化。结果显示:适用于海带ISSR扩增反应的最佳体系(20μL)为:1×PCR buffer,1.2 mmol/L Mg2+,0.2 mmol/L d NTPs,1.0μmol/L ISSR引物,40 ng模板DNA,0.25 U Taq DNA聚合酶;扩增PCR程序为:95℃预变性3 min;95℃变性45 s,52℃退火45 s,72℃延伸2 min,共38个循环;最后72℃延伸10 min。在优化的海带ISSR反应条件下,扩增条带稳定,重现性好,为应用ISSR分子标记技术进行海带属遗传多样性研究和分子鉴定奠定了技术基础。

摘要：通过设置不同温度和光照强度,在实验室条件下检验了多肋藻雌、雄配子体在不同温度和光照强度条件下的生长情况。结果显示:多肋藻雌配子体在20℃和1 000 lx条件下生长最快,经过4周生长,配子体平均总长度由81. 27μm增加至10 234. 07μm,相对生长速率约16. 58%,生长速度显著大于其他试验组(P <0. 05);雄配子体在20℃和2 000 lx生长最快,配子体平均总长度由77. 63μm增加至17 215. 33μm,相对生长速率约18. 54%,生长速度与20℃和1 000 lx试验组差异不显著,但显著大于其他试验组(P <0. 05)。本研究为多肋藻配子体规模化扩增培养提供了数据参考。