摘要：研究了用凝胶色谱纯化人凝血酶原复合物的工艺。采用正交设计优化A50凝胶吸附人凝血酶原复合物的工艺参数,比较不同盐浓度的洗涤液对人凝血因子Ⅸ效价收率和比活性的影响,分析A50凝胶的总离子交换容量及对人凝血因子Ⅸ的吸附能力,确定A50凝胶的使用寿命。结果显示,A50凝胶吸附人凝血酶原复合物的最佳工艺参数为吸附温度20℃、吸附时间60 min、吸附胶量为1.5%、吸附pH 7.0;洗涤液中氯化钠的最佳浓度为0.18 mol/L;A50凝胶可在有效期内重复使用40次。

摘要：目的优化辛酸沉淀工艺参数,并结合两步层析纯化,评价10%静注人免疫球蛋白(intravenous immunoglobulin,IVIG)中杂蛋白去除效果。方法对溶解倍数、反应液终pH值、辛酸钠浓度3个因素进行优化,设计3因素3水平的正交试验方案,优选辛酸沉淀工艺参数;取100 g组分Ⅱ+Ⅲ沉淀,按最佳工艺参数进行辛酸沉淀,过滤收集上清经Q、QXP两步层析纯化后,进行IgG、IgA、IgM、Alb含量及纯度检测,评价杂蛋白去除效果。结果辛酸沉淀法最佳工艺参数为溶解倍数13倍,反应液终pH值5.1,反应液辛酸钠终浓度20 mmol/L;按最佳工艺参数获得的辛酸沉淀上清经两步层析纯化后纯度达99.99%,杂蛋白含量降至1 mg/L以下。结论辛酸沉淀法可最大限度提升IgG收率,给合后续两步层析纯化,可获得高纯度IgG。该工艺可用于临床安全的人免疫球蛋白产品开发。

摘要：目的:评价博雅生物制药集团股份有限公司研制的人凝血酶原复合物治疗乙型血友病患者的有效性和安全性。方法:采用多中心、开放、单组设计开展Ⅲ期临床研究,5家研究中心共入组36例乙型血友病受试者,根据受试者出血的严重程度及凝血因子Ⅸ的需求输注人凝血酶原复合物,以第一次输注结束后30 min凝血因子Ⅸ活性输注效率值为主要疗效指标,以每次出血首次输注后24 h出血症状和体征改善情况及第一次输注结束后30 min凝血因子Ⅸ活性的升高幅度为次要疗效指标。结果:36例受试者均纳入安全性分析集(SS)、全分析集(FAS)和符合方案分析集(PPS),第一次输注结束后30 min凝血因子Ⅸ活性输注效率值为(104.600±21.518)%。第一次输注结束后24 h的出血症状和体征改善评分,基线出血(受试者百分比)和基线后出血(事件百分比)评分优良率分别为83.3%和94.6%,改善率分别为16.7%和5.4%,有效率(优良率+改善率)均为100%。第一次输注结束后30 min凝血因子Ⅸ活性的升高幅度为(29.300±9.254)%。未出现严重不良事件,未见人凝血因子Ⅱ,Ⅶ,Ⅸ和Ⅹ抗体及新增病毒感染。结论:输注人凝血酶原复合物能够显著提高乙型血友病患者体内的凝血因子Ⅸ活性水平,人凝血酶原复合物总体安全性良好。