摘要：1,3-丙二醇是一种重要的化工原料,越来越受到广泛的关注.以弗氏柠檬酸菌和克雷伯氏菌的总DNA以及宏基因组为模板,克隆并表达了3个不同来源的甘油脱水酶基因,前两者均有活力,而后者则没有活力.为了改造甘油脱水酶使其更有利于工业化生产,通过同源建模(homology modeling)构建了这3个甘油脱水酶的三维结构,并利用一些生物信息学软件对这3个甘油脱水酶进行亚基之间的杂合改组(gene swapping)的理性设计,根据设计结果对这3种不同来源的甘油脱水酶的大、中小亚基基因分别进行了克隆.通过基因交换的方法对甘油脱水酶大、中小亚基进行了杂合,得到6种异源亚基杂合酶.部分杂合酶的酸碱稳定性、热稳定性及Vmax得到了明显的改善,同时杂合改组使本没有活力的来源于宏基因组的甘油脱水酶具有了活力而且杂合酶的热稳定性也得到了显著提高.根据构建的三维结构分析了结构差异对酶学性质的影响.

摘要：根据GenBank提供的沙门菌invA基因序列和志贺菌ipaH基因序列设计引物，建立了二重PCR方法，在同一反应体系同时检测两种致病菌核酸，经二重PCR方法扩增后，在同一泳道同时检出沙门菌284bp和志贺菌611bp特异性扩增条带，而普通大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、变形杆菌、阪畸大肠埃希菌、绿脓杆菌、蜡样芽胞杆菌、马链球菌、产单核细胞李斯特菌、鹅大肠埃希菌、猪水肿病大肠埃希菌均未出现这两种条带。对PCR产物进行测序，测序结果与已发表的基因核苷酸序列比较，沙门菌同源性为93％～100％，志贺菌同源性为98％～100％。应用建立的沙门菌和志贺菌二重PCR方法对广西6个试验猴养殖场1665份猴粪便样品进行检测，检出沙门菌阳性25份，志贺菌阳性90份，阳性检出率分别为1．5％和5．4％。表明建立的沙门菌和志贺菌二重PCR检测方法特异性强、敏感性高，适用于临床粪便样品的快速检测。

摘要：研究制定动物源性食品中奇异变形杆菌的PCR检测方法,为日常食品卫生监测提供快速检验的依据。根据奇异变形杆菌抗亚碲酸盐基因的保守序列设计Q248F/R,确定PCR条件,利用标准菌株检验方法的特异性和敏感度。引物Q248对奇异变形杆菌检测具有良好的特异性,对人工布菌样品的检测敏感度达1.2×102cfu/100g。通过对扩增目的片段的核酸序列测定,目的片段大小为248bp。该方法用于奇异变形杆菌检测具有特异性强、敏感、快速的特点,适用于动物性食品中奇异变形杆菌检测的快速筛选检验。

摘要：本研究旨在建立准确、可靠、稳定的检测蜂蜜中嗜渗酵母计数的分析方法。分别采用GB 14963-2011中嗜渗酵母计数的涂布方法以及GB 4789.2-2010中菌落总数测定的倾注法,对蜂蜜样品中的嗜渗酵母计数。并通过以上两种不同方式对不同温度下储藏的蜂蜜样品进行比较试验。结果发现同一样品、同一稀释度、同样的培养条件下,使用倾注法测得的嗜渗酵母数量比涂布法更多,差异极显著(P<0.01)。对经不同温度下储藏的蜂蜜样品进行嗜渗酵母计数,各浓度条件下倾注法计数结果比涂布法更多,差异极显著(P<0.01)。

摘要：本文回顾了我国实验室设计装修行业发展历程,包括基础薄弱阶段、专业化起步阶段和专业化标准化发展提升阶段,并结合检验检测实验室专业特点,分析实验室设计装修过程中面临的专业资质欠缺、专业设计人员短缺、标准体系不完善等问题,提出加强相关人员学习教育、培养专业技术队伍、加强顶层设计、推动检验检测实验室设计装修工作标准化的解决思路。

摘要：以猪圆环2型病毒为材料,设计了2对引物,构建了猪圆环2型病毒实时环介导等温扩增(LAMP)检测方法,并进行敏感性和特异性确定。建立的猪圆环2型病毒实时LAMP检测方法,通过应用实时浊度仪可以对猪圆环2型病毒进行快速检测。

摘要：根据Genbank提供的沙门氏菌ttrBCA基因序列设计引物和探针,建立了食品沙门氏菌实时荧光PCR快速检测方法。结果显示,该方法只对沙门氏菌基因呈阳性反应,而对其它常见非阳性菌株(志贺氏菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、奇异变形杆菌、普通变形杆菌、绿脓杆菌、单增李斯特氏菌、阴沟肠杆菌、副溶血性弧菌)基因组DNA均呈阴性反应,对模拟添加沙门氏菌样品检测,检测低限为240cfu/mL沙门氏菌的DNA,检测食品样品增菌液,仅需约3h,结果表明,该方法适用于食品样品的快速检测。

摘要：根据猪细小病毒(PPV)结构蛋白VP2基因序列,设计合成1对引物,建立了检测PPV的PCR方法.检测14份临床组织,检出阳性11份,阳性检出率为79.5%.阳性样品扩增产物用EcoRⅠ酶切得到了预期的结果,对PCR产物进行测序,测序结果与已发表的PPV基因核苷酸序列比较,同源性达99%～100%,所编码的氨基酸同源性为93%～100%.从PCR检测阳性的一份病料组织中分离出1株PPV.试验证明,建立的PPV PCR检测方法特异性强、敏感性高,适用于临床样品的快速检测.

摘要：本试验针对非洲猪瘟病毒基因保守序列设计了四对引物和探针用于微滴式数字PCR检测,经过数字PCR梯度反应体系及条件优化、特异性试验、灵敏度和线性范围试验,最终确认了一对引物和探针结果较为理想,其中引物浓度为900 nmol/L,探针浓度450 nmol/L,最适退火温度为54.2℃。

摘要：根据Genebank提供的沙门氏菌invA基因序列和志贺氏菌ipaH基因序列设计引物,分别建立了检测2种致病菌的PCR方法。应用于检测临床试验猴粪便样品85份,检出沙门氏菌阳性3份,志贺氏菌阳性9份,阳性检出率分别为3.5%和10.6%。试验证明建立的沙门氏菌和志贺氏菌PCR检测方法特异性强、敏感性高,适用于试验猴临床粪便样品的快速检测。