摘要：【目的】探索长顺绿壳蛋鸡GRIN1基因3′非翻译区(untranslated region,UTR)多态性对蛋壳品质的影响。【方法】选择185只健康蛋鸡,测定其第45周龄产蛋的蛋质量、蛋形指数、蛋壳强度、蛋壳厚度和蛋壳质量5个指标;使用NCBI和PrimerPremier 3.0设计引物,采用正向测序法筛选GRIN1基因在3′UTR区域的SNP位点。【结果】GRIN1基因的3′UTR检测到4个SNP位点:g.30871C>T、g.31017A>G、g.31158A>C和g.31166G>C,其中仅g.31158A>C和g.31166G>C之间存在强连锁不平衡,且g.30871C>T和g.31017A>G都极显著偏离哈代—温伯格平衡(PG与蛋壳品质的关联分析中,GG基因型的蛋质量显著高于AA基因型(P0.05)。【结论】长顺绿壳蛋鸡GRIN1基因与蛋壳品质存在显著关联;g.31017A>G对蛋壳品质有显著影响,能够作为改善蛋壳品质的分子标记位点参考。

摘要：本研究旨在通过克隆获得鸭(Anas platyrhynchos)SCD-1基因启动子序列,预测其生物学信息,并探究鸭SCD-1基因的转录调控机制,为改善畜禽机体脂肪沉积的研究提供新思路。利用在线启动子分析软件对SCD-1基因启动子区序列信息进行分析,以三穗鸭DNA为模板,设计特异性引物,进行PCR扩增、测序,进而构建p GL3+启动子的表达载体,转染PC3细胞并进行双荧光素酶报告基因检测,然后以浓度梯度为0(对照)、10μmol/L、20μmol/L、30μmol/L、40μmol/L、50μmol/L的亚油酸和EPA作为外源刺激因子刺激启动子。试验结果显示,SCD-1基因启动子区域(位于g.951648~g.952634)分别有CAAT-box和GC框各1个和4个转录因子结合位点(TFIID,CAAC-binding-f,AP-2,ER和NF-1);启动子转录活性序列强弱依次为pGL3-basic-S1>pGL3-basic-S4>pGL3-S2>pGL3-basic-S3。鸭SCD-1基因启动子在亚油酸和EPA的刺激下转录活性显著增强(p<0.05),其中当亚油酸和EPA浓度在10μmol/L时,鸭SCD-1基因启动子的转录活性最强,总体上相同浓度梯度亚油酸和EPA刺激启动子时,EPA对鸭SCD-1基因启动子转录活性的作用弱于亚油酸。本实验初步确定了该基因的启动子区域,并成功构建了4个具有转录活性的鸭SCD-1基因启动子表达载体,为进一步研究SCD-1基因转录调控机制提供理论依据。