摘要：目的建立A（H3N2）亚型流感病毒R292K和N294S突变位点TaqMan-MGB探针检测方法．方法由NCBI获取的6株流感疫苗株及2012年～2015年本实验室分离的17株，共计23条A（H3N2）亚型毒株NA基因全序列．根据序列比对结果，特异性设计针对R292K和N294S突变位点的TaqMan-MGB探针及引物进行3重realtimeRT-PCR检测方法．使用倍比稀释的方法检测其敏感性．并利用临床标本，其他亚型流感及其他常见呼吸道病毒验证该方法的特异性．结果设计的TaqMan-MGB探针可以检测到107（1000copies）稀释度的对应模板，使用其他亚型流感病毒与常见呼吸道病毒验证该引物无交叉反应．通过对57份日常监测分离毒株进行检测，未发现耐药位点突变株．结论建立了A（H3N2）亚型流感病毒R292K和N294S突变位点TaqMan-MGB探针检测方法；验证了该引物探针具有较高的敏感性与特异性，具有实际应用潜力．