摘要：目的建立一种用于种属鉴定的线粒体DNA16SrRNA基因和细胞色素b基因荧光标记复合扩增检测体系。方法利用引物设计软件Primer5.0对mtDNA序列的16SrRNA基因和细胞色素b基因各设计一对引物,建立复合扩增体系,分别扩增人和牛、猪、狗、鸡、草鱼5种常见动物,用310遗传分析仪对产物进行分析。结果人和5种动物DNA扩增产物均出现两个峰,Cytb通用引物的扩增产物为人与动物的共有峰,为358bp;16SrRNA基因的扩增产物为人与动物间存在位置差异的特异峰,位于231～256bp之间。结论该复合扩增体系可以明确区分人和5种动物样本,可用于种属鉴定。

摘要：目的初步构建DNA甲基化联合SNP分型体系,探索其用于精液来源鉴定的价值。方法首先通过分析甲基化芯片数据筛选出精液特异性的甲基化位点,通过软件设计出各位点特异性引物,再利用SNaPshot技术对各位点相邻的SNP进行检测,尝试鉴定精液来源。结果本实验成功构建了以精液作为鉴定对象的四位点甲基化-SNP分型复合检测体系,其对62份随机取样的中国汉族体液样本的鉴定结果表明其特异性良好,可准确区分出44份精液或精斑样本与其他三类共18份体液样本。且其灵敏度佳,在转化DNA量为0.5ng时仍可获得完整分型。在混合斑实验中,当精液与阴道分泌液体积比例为1∶40时,该复合体系仍能获得精液完整的分型图谱。结论该四位点复合分型体系在精液鉴定中具有重要价值,证明了DNA甲基化联合SNP分型体系用于体液鉴定的可行性。