摘要：目的对γ-突触核蛋白(synuclein)基因进行克隆,并对其表达及纯化条件进行优化。方法根据GenBank中γ-突触核蛋白的基因序列,设计PCR引物,从人脑cDNA文库中扩增γ-突触核蛋白的编码DNA序列,将其克隆至pGEX-6p-1载体中,构建重组质粒,将测序正确的重组质粒转化入大肠杆菌BL21(DE3)中,用IPTG诱导表达;对培养温度、IPTG的用量、诱导时间等条件进行了优化;用SDS-PAGE和质谱分析表达的目标蛋白;用亲和层析、离子交换层析、凝胶过滤纯化目标蛋白。结果γ-突触核蛋白在大肠杆菌中高效、可溶性表达,经质谱鉴定及SDS-PAGE分析,表达产物为γ-突触核蛋白。经过纯化,得到纯度高达98%的γ-突触核蛋白。结论成功地在大肠杆菌中高效表达了γ-突触核蛋白,并建立了纯化工艺,得到高纯度的重组蛋白,为进一步研究γ-突触核蛋白的晶体结构、生物学活性及功能,探讨其在肿瘤中的发病机制奠定了基础。

摘要：目的了解本地区新型冠状病毒肺炎期间临床用血特点,为制定疫情下的用血管理政策提供数据支持。方法设计《临床用血分析报告模板》,发放至各医疗机构,汇总2020年第一季度主要相关用血指标并进行同期比较,形成分析报告,相关数据进行统计学分析。结果1)2020年第一季度,我市临床血液制品用量血小板类小幅下降,红细胞类、血浆类、冷沉淀类呈较大幅度下降。2)2020年一季度同期比,三级医疗机构出院总人次(χ2=38.12,P<0.01)、手术台次(χ2=240.5,P<0.01)、输血总人次(χ2=648.7,P<0.01)、手术患者输血人次(χ2=139.2,P<0.01)与二级医疗机构比较,差异均有显著统计学意义,二级医院下降幅度更大。3)主要用血科室红细胞类用量分析:三级医疗机构疫情期间的手术患者、血液科、内科、外科、门急诊、ICU患者及妇产科红细胞用量与去年同期比较,差异均有显著统计学意义(P<0.01);二级医疗机构内科及外科(P<0.05)同期比,差异有统计学意义。结论新冠疫情期间,地区用血量较非疫情期间呈较大幅度下降;疫情对规模较小的医疗机构的总体用血量影响要大于三级医院;三级医院手术患者红细胞用量、血液科红细胞用量、ICU红细胞用量均呈增长趋势;疫情期间管理部门应加强门急诊输血策略的指导和监督。

摘要：目的在大肠杆菌中高效表达变异链球菌核糖-5-磷酸异构酶A(ribose 5-phosphate isomerase A,rpiA),并对表达产物进行纯化和鉴定。方法根据GenBank中变异链球菌UA159株基因组rpiA的DNA编码序列,设计PCR引物,扩增变异链球菌核糖-5-磷酸异构酶A的DNA编码序列,将其克隆至pGEX-6p-1载体中,构建重组质粒,将测序正确的重组质粒转化入大肠杆菌BL21(DE3)中,用异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(isopropylβ-D-1-thiogalactopyranoside,IPTG)诱导表达;对培养温度、IPTG用量、诱导时间等条件进行了优化;用亲和层析、离子交换层析纯化目标蛋白;用SDS-PAGE和质谱对目标蛋白进行鉴定。结果变异链球菌核糖-5-磷酸异构酶A在大肠杆菌中高效、可溶性表达,经质谱鉴定及SDS-PAGE分析,表达产物为变异链球菌核糖-5-磷酸异构酶A蛋白。经过纯化,得到纯度高达95%的变异链球菌核糖-5-磷酸异构酶A。结论成功地在大肠杆菌中高效表达了变异链球菌核糖-5-磷酸异构酶A蛋白,并建立了纯化工艺,得到高纯度的重组蛋白,为进一步研究变异链球菌属核糖-5-磷酸异构酶蛋白的生物学活性及功能奠定了基础。

摘要：近年来国家大力扶持中医药的发展,特别是随着健康观念变化和医学模式转变,中医药越来越显示出独特优势。但是国内主流诊断方式还是以西医为主,中医资源有限,中医专家的门诊医疗资源供不应求。常见病的患者往往会选择自行到药店购买中成药,而药店存在为牟取利益,歧义引导顾客购买价格偏高药物的现象,且疗效并未达到预期效果,因此造成患者病程延长、药费昂贵且徒增抱怨。智能自助中医辨证与中成药推荐系统-"万义中医"移动App,主要解决患者在就医时所产生的看病难、看病贵的问题,并为患者提供常见病的初步诊断结果及合理药物推荐方案。与其他医疗App不同,万义中医App为患者预先诊断后再提供用药,具有一定的创新性。