摘要：【问题导读】读后续写是一种富有挑战性的写作形式,它要求我们在理解原文的基础上,合理推测故事情节的发展,并巧妙地将其续写下去。为了实现这一目标,利用问题链来巧续衔接句是一种非常有效的方法。通过构建问题链,我们可以巧妙地设计衔接句,构思出一个完整、连贯的故事。这种方法不仅有助于我们深入理解原文,还能丰富我们的想象力,激发我们的创造力,使读后续写变得更加有趣,同时,使故事情节的发展更加连贯、自然。

摘要：旨在提供一种新型的转录激活样效应子核酸酶(Transcription activator-like effector nucleases,TALENs)模块组装法(Unit assembly,UA)及活性鉴定方法。利用TALE-NT 2.0在线工具在线粒体DNA(Mitochondrial DNA,mt DNA)设计TALENs识别位点和剪切位点,借助p EGFP-N1质粒将该段靶序列随机整合于HEK293F核基因组中,构建HEK293F-T1细胞系,用于TALENs活性鉴定。依据转录激活样效应子(Transcription activator-like effectors,TALEs)自然单元模块序列,设计出一种新型的人工TALEs偏单元;根据TALENs识别位点,选取相应一单元模块,利用UA法组装;并设计出含有相应双酶切位点的TALEs串联模块序列和TALENs载体序列,定向连接后瞬时转染HEK293F-T1细胞系。结果显示,新型模块组装法定向组装TALEs模块,克隆效率高且瞬时转染后可看到清晰的套峰。结果表明,新型模块组装方法提高了TALENs构建过程中的克隆效率,并且不受末位0.5模块的RVD(repeat-variable diresidue)限制,增加了靶序列设计的灵活性。