摘要：L-丙氨酸作为最小的手性化合物之一,被广泛应用于食品、医药和日化领域。目前,微生物法生产L-丙氨酸存在发酵周期长,生产强度低等问题。为此,通过强化前体供给、启动子工程和转运工程等代谢工程策略,构建高产L-丙氨酸的大肠杆菌细胞工厂。进一步通过生化工程策略优化L-丙氨酸生产工艺,提高L-丙氨酸大肠杆菌细胞工厂的生产性能。结果:过表达gapA(3-磷酸甘油醛脱氢酶基因)强化前体丙酮酸供给,使L-丙氨酸产量和转化率分别提高了5.1%和15.6%。启动子工程优化gapA表达,使L-丙氨酸产量和转化率进一步提高到18.3 g/L和0.55 g/g。过表达L-丙氨酸外运蛋白(AlaE),增加L-丙氨酸转运,使L-丙氨酸产量提高到20.4 g/L。生化工程策略优化培养基组分,得到最佳碳源为葡萄糖40 g/L,最佳氮源为(NH4)2SO425 g/L。最佳发酵条件为:接种量15%,10 h转厌氧发酵和变速补料发酵。5 L发酵罐发酵36 h,大肠杆菌菌株W-135 L-丙氨酸产量为127.2 g/L,转化率为0.83 g/g,生产强度为3.53 g/L/h,比优化前分别提高了64.3%,50.9%和64.2%。本研究利用系统代谢工程和生化工程策略,构建了发酵周期短和发酵工艺简单的L-丙氨酸高产菌株,为L-丙氨酸的工业化生产提供了理论基础。

摘要：采用微波辅助提取桔梗总皂苷。以总皂苷得率为指标,在单因素试验的基础上,通过响应面法优化提取工艺,并研究桔梗总皂苷的抗炎活性。结果显示:最佳提取条件为微波功率210 W、微波时间3.5 min、固液比1∶17.5(g/mL)、乙醇体积分数80%,在此条件下桔梗总皂苷得率为5.5%。抗炎活性试验结果表明,桔梗总皂苷含有抑制炎症因子,具有较好的抗炎活性。

摘要：研究桔梗总皂苷对痛风性关节炎小鼠的影响及基于NLRP3/ASC/caspase-1途径的抗炎作用。将小鼠分为空白组、模型组、秋水仙碱(1 mg/kg)组和桔梗皂苷(25、50、100 mg/kg)组,连续灌胃7 d。在第5 d灌胃1 h后,将小鼠麻醉,踝关节处消毒后将MSU注射到关节中。通过测量关节肿胀程度和检测炎症因子、过氧化物因子和相关蛋白的表达水平,阐明桔梗总皂苷治疗痛风性关节炎的抗炎作用。结果表明,桔梗总皂苷能有效减轻肿胀,降低炎症因子和过氧化物水平。桔梗总皂苷能够改变炎症区域的细胞形态,踝关节处的NLRP3、ASC、caspase-1和IL-1β的蛋白质水平也显著降低。因此桔梗总皂苷能有效缓解MSU引起的痛风性关节炎,其机制与NLRP3/ASC/caspase-1途径上的蛋白减少有关。

摘要：抗性糊精以玉米淀粉为原料,不同工艺制备的抗性糊精结构、理化性质等不同,进而对人体消化酶的抵抗作用存在差异。本实验采用3类不同工艺(干热法、α-淀粉酶、α-淀粉酶及转苷酶法)制备抗性糊精,对其溶解度、键型结构、消化率、形态结构进行表征,探究抗性糊精品质与其制备工艺间的关系。结果表明:不同工艺所制备抗性糊精的溶解度均接近100%,水分活度均低于0.3,稳定性良好。进一步强化反应条件会改变抗性糊精结构,使α-1,4糖苷键水解,形成的α-1,6、α-1,2、β-1,6糖苷键是消化酶抵抗作用的基础,分支结构以α-1,6和β-1,6糖苷键连接为主。酶使淀粉分子由有序晶体转变为无序晶体,结晶度降低。添加转苷酶后,抗性糊精平均分支度增加,最高达到55%,此时对人体消化酶抵抗作用最强。扫描电子显微镜及凝胶渗透色谱分析结果表明,添加两类酶后抗性糊精均存在再聚合过程,分子体积增大的同时分子质量下降,分子内部存在间隙。本研究可为生产更高品质的抗性糊精提供新思路。

摘要：通过表征超高压条件(500 MPa,10 min)对抗性糊精制备各阶段的结构及性质影响,探究难消化性更强的抗性糊精制备条件。结果表明,在高温(170℃,2 h)、酸化(基于淀粉质量10%的盐酸)及超高压(500 MPa,10 min)条件下,糊精化过程得到促进,结晶度降低的同时淀粉分子被水解成更小分子质量的短链糖和糊精片段。超高压在各阶段均促进酸热发挥作用,溶解度提升,达到80%左右,水分活度(AW)整体低于淀粉,影响食品稳定性的反应难以发生。键型结构方面,超高压处理后新形成的键型包括α-1,2、α-1,6、β-糖苷键、还原端等结构,新键型不利于再结晶和双螺旋结构的形成,故平均聚合度(DP)降低。高压与转苷酶联用对两者的转糖苷作用使得抗性糊精平均分支度(DB)大幅增加,远高于焦糊精,最高达到45.54%,此时难消化性最强。超高压助于α-淀粉酶淀粉分子解聚的基础上,也提供给了转苷酶更多的底物,间接增进酶反应效率。

摘要：抗性糊精是以淀粉为原料生产的功能性低聚糖,对细菌生长繁殖利用的酶存在一定抑制作用。研究抗性糊精对冷鲜猪肉的保鲜作用,考察并比较不同条件下抗性糊精对冷鲜猪肉微生物、理化、感官等指标的影响,最终得到最优处理条件。实验表明:最佳浸泡时间5min的情况下0.1g/mL抗性糊精单独使用时即可抑制冷鲜猪肉感官品质的下降、微生物的各类活动、pH、TBA值的上升以及挥发性盐基氮的积累。0.1g/mL抗性糊精分别复配其他各梯度抑菌剂实验,综合感官性状、抑菌效果、处理时间、市售实际,最优处理条件为:抗性糊精质量浓度0.1g/mL,复配助剂为0.2%乙酸,浸泡时间为5min。优化处理后冷鲜猪肉保质期从对照组2天延长至6天,该研究为冷鲜肉保鲜剂提供新思路。

摘要：抗性糊精是一种功能性膳食纤维,在现代工业各个领域有着广泛的应用。近几年,抗性糊精的生产方法,无论是原料还是提纯方法都在不断创新。抗性糊精在食品、保健品、调味品等领域逐渐受到行业内研究人员的重视与应用,也开始走进公共视野,具有广阔的应用前景。文章从抗性糊精的生产方法、现行主要应用及未来应用发展趋势进行综述。

摘要：该研究通过对L-丙氨酸压力下大肠杆菌的转录组进行分析,利用mKate荧光蛋白进行表征,筛选响应L-丙氨酸的启动子元件。转录组筛选了ArgK、FlgG、GlgP、CpxP、BetA、GlpA、KdpB、PulG、LivH和YhfX十个在L-丙氨酸压力下转录水平显著提高的基因,并将基因前500 bp潜在的启动子片段与荧光报告蛋白基因m Kate融合,筛选得到特异性响应L-丙氨酸浓度的启动子PAla-7。结果表明,PAla-7启动子在10 g/L、20 g/L、30 g/L、40 g/L、50 g/L和60 g/L L-丙氨酸诱导后的相对荧光强度分别增加了49%、122%、181%、275%、432%和705%,表明PAla-7启动子在L-丙氨酸质量浓度0~60 g/L范围内有着良好的灵敏性。选择11种常见氨基酸诱导PAla-7启动子表达,只有L-丙氨酸在诱导质量浓度从10 g/L增加到20 g/L时,相对荧光强度增加了52.4%,表明PAla-7启动子是特异性响应L-丙氨酸的启动子。

摘要：L-丙氨酸是一种中性非必需氨基酸,不仅可用于蛋白质的合成,在食品领域还可以用作增味剂、防腐剂、保鲜剂,在医药领域可用于药物原料,在日化领域可用于温和表面活性剂合成。目前,L-丙氨酸的生产方法主要有化学合成法、水解提取法、酶转化法以及微生物发酵法。化学合成法生产的L-丙氨酸质量较差,生产过程易造成环境污染;水解提取法生产过程较复杂,不适宜规模化和工业化生产;酶转化法需用L-天冬氨酸作为原料,成本较高。相较而言,微生物发酵法更适宜用于工业化生产。该文介绍了L-丙氨酸在食品领域、医药领域和日化领域的应用研究进展,重点阐述了微生物发酵法产L-丙氨酸的研究进展,以期为L-丙氨酸在发酵食品行业的进一步研究及开发应用提供参考。