摘要：目的建立基于微流控芯片平台的中东呼吸综合征冠状病毒(MERS-CoV)一体化自动检测方法。方法制备MERS-CoV假病毒颗粒阳性参考品,设计针对病毒ORF1b基因区的引物和探针,制备基于实时荧光RT-PCR全流程的一体化集成微流控芯片,实现含样品裂解、核酸提取、核酸扩增和荧光检测的全自动检测。利用芯片内预包埋的内参基因对芯片系统性能进行监测,利用MERS-CoV假病毒阳性参考品对方法的灵敏度、特异性和重复性检测评价。结果微流控芯片中内参基因可以稳定扩增。自动化方法可检测原始样本中100拷贝(copies)的MERSCoV假病毒,优于常规实时荧光RT-PCR(500 copies检出限);100 copies假病毒重复测试6次CT值为(39.80±0.53),变异系数为1.34%。用自动化方法检测其他冠状病毒和人源基因均为阴性。结论建立的MERS-CoV微流控芯片一体化自动检测方法具有良好的稳定性、灵敏度和特异性,操作简便、快速,不受实验场地限制,可用于中东呼吸综合征现场即时检测。

摘要：目的 建立梅毒螺旋体重组酶介导核酸扩增(RAA)快速检测方法。方法 根据梅毒螺旋体poly A基因序列设计引物和探针,通过引物组合优化,筛选建立梅毒螺旋体RAA检测方法,利用质粒标准品评估方法的灵敏度和重复性,检测HIV、HBV、HCV等血液传播疾病病原体,评价方法的特异性。结果 建立的梅毒螺旋体RAA方法的灵敏度可达10拷贝/反应,在最低检测限仍有较好的重复性,检测时间少于20 min,最快2~3 min即可观察到扩增信号,与HIV、HBV和HCV及正常血液样本无交叉反应。结论 建立的梅毒螺旋体RAA方法灵敏、快速、特异性好,适用于基层实验室和口岸现场快速检测梅毒螺旋体。

摘要：目的建立乙脑病毒重组酶介导逆转录核酸扩增(RT-RAA)快速检测方法。方法根据乙脑病毒NS1基因片段设计引物和探针,通过优化筛选确定最佳引物组合,建立乙脑病毒RT-RAA检测方法,并对其检测灵敏度和特异性进行测试。结果建立的乙脑病毒RT-RAA检测方法灵敏度可达10拷贝,方法检测时间少于20 min,最快2-3 min即可观察到明确荧光扩增信号,与登革病毒、黄热病毒、寨卡病毒、基孔肯雅病毒及正常血液样本无交叉反应。结论建立的乙脑病毒RT-RAA检测方法灵敏、快速、特异性好,适用于口岸现场乙脑病毒的快速检测。

摘要：目的 对北京口岸出境人员进行结核病防治知识知晓情况调查,为开展口岸结核病防控及其宣传教育提供依据.方法 采用《全国第五次结核病流行病学抽样调查现场知晓率调查问卷》设计的5条核心信息,及针对出境人员的检疫要求采用自行设计的6条信息,统计知晓率并分析影响因素.调查采用整群抽样,对2013年1月1日至12月31日经我部门进行出境体检的5290名体检者进行结核病防治知识知晓一对一问卷调查.5290份调查问卷全部收回有效,有效率100.00％.5条核心信息知晓情况采用二项分布Z检验、秩和检验,自行设计6条信息知晓情况采用F检验和f检验.以P＜0.05为差异有统计学意义.结果 （1）5条核心信息总知晓率为63.14％（16 700/26 450）.核心信息知晓情况的影响因素分别与性别、户籍、学历和职业等相关,其中男性（65.41％,7950/12 155）高于女性（61.21％,8750/14 295）（Z=6.428,P＜0.05）、15～岁年龄组（61.33％,5336/8700）低于其他年龄组[30～岁年龄组为64.01％（5518/8620）,45～岁年龄组为64.01％（4468/6980）,60岁年龄组为64.09％（1378/2150）]（Z=14.503,P＜0.05）;大专及以上学历人群（64.72％,9465/14 625）高于其他学历人群[小学组为59.09％（650/1100）,初高中＋中专为61.24％（6568/10 725）（Z=25.718,P＜0.05）;城市户籍人群（63.72％,14 475/22 715）高于农村户籍人群（59.57％,2225/3735）（Z=4.01,P＜0.05）;医务人员（75.22％,346/460）高于其他职业人群[管理技术人员为67.80％（4644/6850）,劳务人员为60.31％（7678/12 730）,留学生为62.73％（2942/4690）,商务人员为63.37％（1090/1720）（Z=114.227,P＜0.05）.（2）自行设计6条信息中“肺结核患者在迁徙中有病情加重及传播的风险”知晓率较高（65.52％,3466/5290）,“疑似肺结核时需要进行痰检”的知晓率较低（38.90％,2058/5290）.调查结果显示年龄和职业是知晓率的影响因素（F=7.703,F=8.047,P值均＜0.05）.（3）调查对象结核病防治知识来源的媒体偏好主要是医务人员面对面讲解56.90％（3010/5290）,电视44.05％（2330/5290）和报纸43.78％（2316/5290）.结论 北京口岸出境人员结核病核心信息及口岸检疫相关要求的知晓率均有待提高,应进一步加大对该人群相关知识的宣传力度.宣教方式以医务人员面对面讲解为优.