摘要：目的构建micoRNA-205(miR-205)慢病毒表达载体,感染乳腺癌细胞MB231,建立稳定表达miR-205的MB231细胞株,观察其增殖能力的变化。方法酶切慢病毒载体GV369,设计并合成miR-205引物,通过PCR扩增目的基因连接到慢病毒载体上。对重组质粒双酶切鉴定,进行慢病毒hsa-miR-205的包装和滴度测定。用构建好的慢病毒感染MB231细胞,定量PCR检测细胞中miR-205表达水平的变化,MTT和划痕实验观察过表达miR-205后MB231细胞增殖和迁移能力的变化。结果测序显示,目的基因连接慢病毒载体成功。慢病毒稳定感染了MB231,定量PCR结果显示,感染hsa-miR-205的MB231中miR-205表达明显提高,MTT和划痕实验结果显示感染后MB231的细胞增殖和迁移能力受到抑制。结论成功构建了miR-205慢病毒表达载体,并建立了稳定表达miR-205的细胞株MB231,显示其可能负调控乳腺癌细胞的恶性生物学行为,为后期进一步研究miR-205的功能和机制奠定了基础。

摘要：针对油气回收的蒸发损耗主要因素及危害进行了综合调研分析,探究了国内外油气回收的现状和意义,结合某站点的实际条件,分别从集输系统、油品运输和油品储存三个方面展开研究,选定并提出了降低油气损耗的措施和技术设计方案,为油气回收提供了一定的参考。