摘要：将哺乳动物抗菌肽(Hexapeptide)、两栖类抗菌肽(Magainin)、昆虫抗菌肽(Cecropin A和Melittin)的有效作用部分拼接在一起,以获得一种新型的杂合抗菌肽HMCM。根据HMCM氨基酸序列和大肠杆菌B细胞的密码子偏好性设计了HMCM的基因序列;将目的基因克隆到原核表达载体pET-32a-c(+),构建了重组表达载体pET-32a-HMCM;再转化原核表达菌株*** BL21(DE3)实现融合表达,通过摸索诱导时间、IPTG浓度、OD600和温度等条件确定了表达最佳条件,并确定了融合蛋白以可溶形式存在;通过亲和层析纯化了融合蛋白,并进行了Western-blotting鉴定;最后用EK酶酶切融合蛋白释放出HMCM,对HMCM的抗菌性进行了初步研究。结果表明HMCM对枯草芽孢杆菌有良好的抑菌作用。

摘要：DEAD-box RNA解旋酶是一种特殊的RNA分子伴侣,参与了RNA代谢,包括前体RNA剪接、核糖体合成、RNA降解以及基因表达,并对植物的发育和抗性等也具有重要作用。根据已报道的拟南芥DEAD-box蛋白,通过同源比对,在NCBI据库中筛选得到一个DEAD-box RNA解旋酶同源蛋白,命名为SlDEAH1,并根据其基因序列设计特异引物,应用RT-PCR方法从野生型番茄(Solanum lycopersicum)AC++中克隆得到了该基因的全长编码区序列。利用生物学网站、软件及实时荧光定量PCR方法,对其进行生物信息学、表达模式、胁迫及激素处理分析。结果表明:SlDEAH1包括2 073 bp的开放阅读框,编码690个氨基酸残基,其编码蛋白有9个保守结构基序,其所涉及到的ATP结合、ATP水解及RNA结合等功能对于解旋酶活性是至关重要的;表达模式分析表明SlDEAH1基因可能在野生型番茄萼片、叶片发育及果实成熟方面起到重要作用;高温、低温、脱水、伤害、盐胁迫不同程度的诱导了SlDEAH1的表达,但在根中该基因的表达受盐胁迫抑制;ABA、ACC、IAA、GA3、MeJA和ZT均不同程度诱导了SlDEAH1的表达,其中ABA诱导效应最为明显。这些结果为进一步研究SlDEAH1在番茄发育和胁迫响应中的功能奠定了基础。

摘要：红菜薹是一种不经春化处理就可开花的天然早花突变体.根据已报道的拟南芥和芸薹属植物春化相关基因的保守区域设计引物,通过PCR和RT-PCR方法从红菜薹中克隆得到了4个春化相关的关键基因片段:BrFRI、BrFLC、BrVIN3、BrSOC1,获得BrFRI起始密码子附近的关键序列,其中BrVIN3基因序列为首次报道,含有PHD区关键区域.Northern和半定量RT-PCR表达分析表明:BrFRI的表达不受春化作用的影响,BrFLC受春化作用的抑制,BrVIN3和BrSOC1受春化作用的诱导.