摘要：目的构建熔解曲线分析法同时检测4种临床常见革兰阳性病原菌，为临床感染性疾病的诊疗提供快速、敏感的分子生物学检测信息。方法选取临床最常见的革兰阳性病原菌：金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、屎肠球菌、粪肠球菌做为本课题研究的检测菌种。根据检测菌种的不同，分别选取不同菌种的特异性靶序列，设计种特异性引物。对种特异性引物分别用标准菌株、临床分离目标菌株、临床分离非目标菌株、非细菌性病原体以及人源基因组DNA进行常规PCR扩增以及扩增产物测序，验证引物的特异性。对目标菌种引物进行荧光PCR预实验，筛选Tm值差异较大的多对引物，进行熔解曲线分析法实验，并对熔解曲线法的反应条件与反应体系进行优化。对优化后的熔解曲线法进行特异性验证。通过检洲加入人血液中的不同细菌浓度对该方法进行敏感性分析。应用所构建的方法分别检测临床分离目标菌种各20株，分析每种菌种的熔解曲线图，熔点温度（Tm值）及其标准差（SD）的变化，评价所构建方法的稳定性。结果①对所设计的种特异性引物经常规PCR扩增产物电泳分析显示，目标菌株均有目的特异性扩增产物，非目标菌株、非细菌性病原体以及人源基因组DNA未出现特片性电泳条带。特异性扩增产物测序所得序列比对分析显示与目的菌种序列相符。②对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、屎肠球菌、粪肠球菌的4对引物同时进行熔解曲线分析和mecA基因熔解曲线分析的条什优化结果：预变性温度94℃、120s，变性温度94℃、20s：退火温度53℃、12s：延伸温度68℃、13s；扩增循环数为40个循环，熔解曲线分析温度75℃～95℃。最佳的引物浓度为300nmol／L。③所建立的方法经特异性分析显示，上述4种目标菌种均有特异性熔解曲线，Tm值依次为81．02℃；80．32℃；82．37℃；83．10℃，峰高（cm）／峰宽（cm）均大于2．6，以此为典型的熔解曲线判断标准，则非目标菌、非细菌性病原体以及人源基因组DNA分析未见典型的熔解曲线。④方法的敏感性分析显示，上述4种目标菌和mecA基因可检测到的血液细菌浓度依次为：550、520、470、500与203CFU／mL。⑤对上述4菌和MRSA的临床分离菌各20株进行检测，结果显示，其平均Tm值依次为（80．96±0．688）℃，（80.20±0．729）℃，（82．42±0．599）℃，（83．20±0．713）℃和（80．11±0．15）℃。结论本研究所设计的针对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、屎肠球菌、粪肠球菌和HmecA基因检测引物具有较好的菌种特异性，可用于相应病原菌熔解曲线分析法的建屯；所构建的熔解曲线法具有较好的特异性、敏感性和稳定性；并具有快速、简便、成本低廉的特点，可用于临床样本的检测；但葡萄球菌属内和肠球菌属内的Tm值较接近，必要时，可进一步用单对引物检测分析以鉴定到种。

摘要：目前,家庭中常用触摸开关、红外遥钮等控制开关,从而控制家用电器(照明灯、空调、电视)。然而,在夜间开启或关闭家用电器时,需要用户到达控制开关安装位置处,按下控制开关后才能开启或关闭家用电器,给用户带来了不便;用户在使用遥控器时,易乱放遥控器,导致夜间难以找到遥控器,给用户带来了不便。为了解决以上技术问题,设计了一种基于树莓派的语音控制系统,为方便用户在夜间开启或关闭家用电器提供了良好的物质基础,能够解决用户在夜间不方便开启或关闭家用电器的问题。

摘要：目的探讨基于生物学变异的质量规范在临床生化质控方案设计中的应用。方法按照Westgard等的报道方法对18个临床生化项目基于生物学变异不同水平质量目标对应的sigma值进行了计算。不精密度（C弼）的数据采用近6个月（2011年5月～10月）室内质控数据。偏倚（Bias）的数据采用该室参加Bio-Rad实验室间质控比对计划（Interlabo—ratory QC Program）中与对等组比较的最近（2011年10月）的偏倚数据。根据sigma值及质控方案性能选择合适的质量目标及质控方案。结果18个生化项目中，分别有7个、2个和6个项目选择了最佳、期望和最低水平的生物学变异的质量规范。Ca，CI和Na目前的性能不能满足最低水平生物学变异质量规范的要求，分别选择了CLIA，88和德国Rilibak质控指南的标准。结论应用基于生物学变异不同水平的质量规范，可以让临床清楚了解检测过程给实验结果带来的误差最大有多少，更有利于检测结果的临床应用。

摘要：0 前言山东鲁西化工集团东阿第八化肥厂由于原合成塔内件满足不了企业对产量和安全生产的要求,经多方面考察和反复论证,决定在原合成塔外结构不变条件下,更换由南京国昌化工科技有限公司设计制造的GC-R212YZB型DN2 200 mm氨合成塔内件.

摘要：目的:构建熔解曲线分析法检测5种临床常见革兰阴性病原菌。方法:选取临床最常见的大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯杆菌、鲍曼不动杆菌、嗜麦芽单胞菌作为目标检测菌种。对目标菌种设计种特异性引物。构建熔解曲线法,并进行特异性验证。检测不同拷贝浓度稀释液进行敏感性分析。检测临床分离目标菌各20株,进行稳定性评价。结果:(1)经预实验后,对Tm值差异较大的铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯杆菌、鲍曼不动杆菌三对引物同时进行熔解曲线分析,对大肠埃希菌、嗜麦芽单胞菌两对引物同时进行熔解曲线分析。(2)特异性验证显示,目标菌种均有特异性的熔解曲线,各自的Tm值依次为88.37、86.32、80.86和87.56、86.32℃。(3)可检测到的拷贝浓度稀释液约为3.0×103copies/mL。(4)稳定性评价的结果显示,Tm值变化范围窄小,差异有统计学意义。结论:所构建的熔解曲线法具有较好的特异性、敏感性和稳定性。

摘要：目的构建熔解曲线分析法检测大肠埃希菌、嗜麦芽单胞菌。方法针对大肠埃希菌的16SrRNA、嗜麦芽单胞菌的促族酶B亚单位(gyrB)基因设计种特异性引物。构建熔解曲线分析法,并进行特异性验证。检测不同拷贝浓度稀释液进行敏感性分析。检测临床分离目标菌各20株,进行稳定性评价。结果特异性验证显示,目标检测菌种均有特异性的熔解曲线,融点温度(Tm)值分别为84.73、82.84℃。可检测到的拷贝浓度稀释液分别为3.56×103、1.21×104 copy/mL。稳定性评价的结果显示,Tm值(x±s)变化范围窄小,差异有统计学意义。结论所构建方法具有较好的特异性、敏感性和稳定性。并具有快速、简便、成本低廉的特点,可用于临床样本的检测。

摘要：目的通过研究结、直肠癌患者肠道拟杆菌属、梭杆菌属和梭菌属量的变化,揭示肠道相关菌群改变在大肠癌发病中的作用及意义。方法收集术前结、直肠癌患者粪便标本40例及正常对照标本40例,根据细菌的靶基因序列设计特异性引物。提取待测粪便标本细菌DNA,应用SYBR Green I实时荧光定量PCR测定不同细菌的数量。结果正常对照组与实验组粪便中细菌数量分别为拟杆菌属(8.76±0.77;9.85±0.88)、梭杆菌属(7.94±1.25;10.0±1.65)、梭菌属(3.54±0.70;6.56±0.68),拟杆菌属中的脆弱拟杆菌为(2.12±0.48;4.07±1.77)、梭杆菌属中的坏死梭杆菌为(2.31±0.26;7.62±2.68)及梭菌属中的肉毒梭菌为(2.76±1.16;5.43±1.21),实验组数量均明显增多(P<0.05)。结论结、直肠癌患者粪便中拟杆菌属、梭杆菌属和梭菌属的数量较正常对照明显增多,提示结、直肠癌的发生发展与肠道菌群有明显关系。

摘要：目的监测2008年我国不同地区15所教学医院医院感染患者中分离的肠杆菌科细菌的耐药性。方法按设计方案收集非重复的1 357株医院感染患者中分离的肠杆菌科细菌。菌株经中心实验室复核后,采用琼脂稀释法测定15种抗菌药物的最低抑菌浓度(MIC),数据输入WHONET5.6软件进行统计分析。结果大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和奇异变形杆菌敏感率较高的药物有美罗培南(97.6%～100%)、帕尼培南(79.8%～98.4%)、亚胺培南(64.9%～98.1%)、厄他培南(91.3%～97.4%)、哌拉西林-他唑巴坦(87.2%～97.4%)、头孢美唑(82.1%～97.0%)和阿米卡星(89.9%～93.8%)。肠杆菌属细菌敏感率较高的抗菌药物有美罗培南(98.7%)、帕尼培南(96.4%)、亚胺培南(95.4%)和阿米卡星(85.7%)。弗劳地枸橼酸杆菌和黏质沙雷菌敏感率较高的药物有碳青霉烯类抗生素(92.0%～100%)、哌拉西林-他唑巴坦(93.1%～99.1%)、阿米卡星(89.0%～94.3%)和头孢吡肟(86.2%～93.1%)。结论碳青霉烯类抗生素、哌拉西林-他唑巴坦和阿米卡星对医院分离的肠杆菌科细菌保持了较高的抗菌活性,头孢美唑对大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和奇异变形杆菌表现出良好的抗菌活性。