摘要：目的建立荧光定量PCR和环介导等温扩增技术(LAMP)检测隐球菌荚膜相关蛋白基因(CAP10)的方法,并比较和评价两种方法的优缺点。方法针对新型隐球菌CAP10基因序列,使用在线软件设计引物,并构建质粒标准品,优化反应条件后用荧光定量PCR和LAMP两种方法检测定量的质粒,分析其敏感性和特异性,并检测临床标本。结果荧光定量PCR检测CAP10质粒的敏感性为6.8×101拷贝,LAMP方法的敏感性为6.8×103拷贝,PCR检测阳性率比LAMP方法高。两种方法特异性好,对脑膜炎奈瑟菌、白色念珠菌、热带念珠菌、黄曲霉、黑曲霉和大肠埃希菌的检测结果均为阴性。结论成功建立了检测CAP10基因的荧光定量PCR方法敏感性和特异性高,但是需要特殊仪器;LAMP方法敏感性较低,但其操作简单,无需特殊仪器和设备,加入核酸染料即能观察结果。两者均适用于新型隐球菌感染的检测。

摘要：目的将焦磷酸测序技术应用于败血症常见病原体的检测鉴定。方法根据细菌16S rRNA序列的特点,设计焦磷酸测序用的PCR扩增引物和测序引物,提取败血症常见病原体的基因组DNA,进行焦磷酸测序,分析获得的序列,进行比对,对病原体种类作出判断。结果经焦磷酸测序可以获取有效长度28 bp的序列,使用该测序序列可以有效区分化脓性链球菌、肺炎链球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、肺炎克雷白杆菌、脑膜炎双球菌、沙门氏菌,但不能区分金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌。结论应用焦磷酸测序可以较有效地对败血症常见病原体的种类实现种属水平的区分。

摘要：多年来,在教学上,笔者采用"以典型的真实工作任务为载体设计教学内容,以工作过程为导向设计教学过程"的教学模式,将"项目教学法"的教学模式引入到《果树生产技术》课程的实践性教学中,取得明显的教学效果。本文阐述"项目"教学内容的设置,"项目教学"在《果树生产技术》实践性教学中的实施方法及效果。

摘要：2013年的中央一号文件首次明确提出,鼓励和支持发展家庭农场。目前,我国各地正积极探索,一些先行试点地区的家庭农场发展已初具规模。发展家庭农场,除了政府加大扶持力度、规范土地流转等相应措施外,要有合理、科学的规划设计,才能保证家庭农场的健康发展。

摘要：目的:建立一种快速、简单的检测粪便幽门螺杆菌的环介导等温扩增方法(loop-medi atedisotherma lamplification,LAMP)。方法:针对幽门螺杆菌的16SrRNA基因设计4条特异性引物(2条内引物和2条外引物),优化反应条件后,对方法的敏感性、特异性进行评估,并评估检测粪便模拟标本的敏感性。结果:使用LAMP方法可以在2h内得到检测结果,加入染料后阳性结果为绿色,电泳后有明显的阶梯状条带。幽门螺杆菌的基因组DNA检测敏感性为12pg,是普通PCR的10倍,对模拟粪便标本进行检测,检测限为102CFU/mL。金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、粪肠球菌的检测结果均为阴性。结论:本研究建立的检测幽门螺杆菌的LAMP方法敏感性高、特异性强,操作简单,不需要特殊设备,是一种很有前景的检测方法。

摘要：目的:构建带Myc标签的大鼠μ型阿片受体的pIRES2-EGFP表达质粒(μ-Myc-pIRES2-EGFP),并实现其在CHO细胞中的表达。方法:以含大鼠全长μ阿片受体基因的μ-pMD20T载体为模板,通过引物设计和扩增,在μ基因C端引入Myc标签,AT克隆至pMD20-T载体中,测序鉴定,经酶切连接克隆入pIRES2-EGFP中,将获得的μ-Myc-pIRES2-EGFP转染入CHO细胞中,应用荧光显微镜观察EGFP表达情况,并用细胞免疫荧光和蛋白印迹检测μ-Myc的表达。结果:测序及酶切结果表明获得带Myc标签的μ基因,构建入pIRES2-EGFP表达质粒中,在荧光显微镜下,转染细胞可以观察到绿色荧光,应用免疫荧光和蛋白印迹观察到目的基因表达。结论:成功构建了μ-Myc-pIRES2-EGFP表达质粒,并在CHO细胞中实现了高效表达。

摘要：山地生态果园建设模式是根据广西实际情况而设计的。文章对生态果园建设的必要性、基本模式以及技术途径进行了阐述,以期对当前开展美丽广西生态田园建设有一定借鉴和指导意义。

摘要：目的构建带FLAG标签的大鼠δ型阿片受体的pIRES2-EGFP表达质粒(δ-FLAG-pIRES2-EGFP),并实现其在CHO细胞中的表达。方法以含大鼠全长δ阿片受体基因的δ-pMD20-T载体为模板,设计引物并行PCR扩增,在δ基因C端引入FLAG标签,AT克隆至pMD20-T载体中,测序鉴定,经酶切连接入pIRES2-EGFP中,将获得的δ-FLAG-pIRES2-EGFP载体转染CHO细胞,应用荧光显微镜观察EGFP表达情况,并采用细胞免疫荧光和蛋白印迹法检测δ-FLAG的表达。结果测序及酶切结果表明获得了带FLAG标签的δ基因,成功构建δ-FLAG-pIRES2-EGFP表达质粒,在荧光显微镜下,转染细胞可以观察到绿色荧光。应用免疫荧光和蛋白印迹法可观察到目的基因表达。结论成功构建了δ-FLAG-pIRES2-EGFP表达质粒,并在CHO细胞中实现了高效表达。

摘要：目的建立TaqMan探针法荧光定量PCR检测方法，用于脑脊液标本细菌的快速检测。方法针对细菌的16srRNA基因，设计合成细茼的通用引物和革兰阳性菌、革兰阴性菌分型探针，通过构建质粒和制作脑脊液模拟标本来研究引物和探针的检测特异度和敏感度。结果两种革兰分型探针只对相应的细菌可以检测到荧光信号，乙肝病毒DNA、白色念珠菌及人基因组DNA检测结果均为阴性，此方法最低可以检测到10个拷贝的质粒DNA以及100CFU／ml的金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌。结论TaqMan探针法荧光定量PCR检测细菌的特异度和敏感度高，检测快速，对脑脊液细菌的早期诊断有重要意义。

摘要：课程根据中国华南地区果树行业和企业生产需要改革培养目标,教学内容根据毕业生就业区域生产特点和典型工作任务设计,改革教学方法,进行多元化教学,在使用多媒体教学和以成功案例为载体进行教学的基础上,师生进入果园开展现场实景教学和实践教学,注重实践教学,实践教学课时比例达55%~65%,教师在学生中建立学习小组实行分组互助教学,培养学生协作工作能力和技术指导能力,建设网络课堂帮助学生自主学习。多年探索与实践使课程教学目标、教学内容、教学方法在改革中取得了较好的效果,通过课程教学学生能够掌握为果树生产一线岗位服务的专业知识和职业技能,初步胜任果树生产一线岗位的工作,学生和用人企业评价好。课程被评为省级精品课程和国家级精品课程,教学团队被评为省级优秀教学团队。