摘要：目的:建立BCR-ABL融合基因质控品,评价人类BCR-ABL融合基因突变检测试剂盒的性能。方法:根据人类BCR-ABL e1a2和e14a2型融合基因m RNA序列,设计覆盖断裂点序列,合成目的融合基因序列。用限制性内切酶BglⅡ和HindⅢ对含有目的融合基因的质粒和表达载体进行酶切,连接酶切产物。将连接产物转化DH5α感受态细胞,筛选单个阳性菌落进行验证。将正确的单个菌落进行超声诱导,制备假病毒溶液。用荧光逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法对假病毒溶液提取的RNA进行检测。结果:PCR结果和测序结果表明成功构建人类BCR-ABL融合基因e1a2和e14a2型假病毒质粒;荧光RT-PCR结果表明构建的e1a2和e14a2型假病毒质粒能够表达目的 RNA,并且能被市售试剂盒正确检出,可以作为RNA质控品。结论:本研究建立人类BCR-ABL融合基因RNA质控品,用于评价BCR-ABL融合基因突变检测试剂盒的性能,为BCR-ABL融合基因相关白血病的临床诊断及靶向治疗提供指导。

摘要：目的建立一种实时荧光定量逆转录PCR方法,对非小细胞肺癌间变淋巴瘤激酶(ALK)融合基因进行快速、敏感和特异检测。方法首先,应用Primer Premier 5.0软件,针对棘皮动物微管相关蛋白4(EML4)-ALK常见融合变异V1、V2、V3a和V3b设计引物和Taqman水解探针。然后,以包含EML4-ALK融合变异V1、V2、V3a和V3b的假病毒颗粒为研究对象,进一步分析所建立方法的灵敏度、敏感性和特异性。最后,用所建立的方法检测50例非小细胞肺癌临床标本,其中包含3例ALK-荧光原位杂交(FISH)(+)样本。结果在无背景RNA干扰情况下,建立的实时荧光定量逆转录PCR方法检测灵敏度高达10拷贝/!l。在500拷贝/!l的野生型背景RNA下,其敏感性达1%,在5000拷贝/!l的野生型背景RNA下,其敏感性达0.5%。对于检测特异性,以正常人白细胞及血浆RNA为研究对象,均未见非特异性扩增。对50例非小细胞肺癌临床标本进行检测,47例阴性标本检测均为阴性,3例ALK-FISH(+)标本2例检测阳性,1例未检出,未检出原因与标本RNA提取失败有关。结论本研究建立的实时荧光定量逆转录PCR方法是一种快速、简便以及具有高灵敏度和特异性的EML4-ALK融合基因检测方法,值得在临床进一步验证和推广。

摘要：目的建立一种可以准确、快速、特异检测乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)的一步法实时荧光定量逆转录PCR(reverse transcription-quantitative real time PCR,RT-q PCR)体系。方法参照NCBI数据库的乙脑病毒全基因组序列,经过一致性比对分析,在乙脑病毒保守的3′非翻译区(3′untranslated region,3′UTR)区段,设计相应的特异性引物以及Taqman-MGB探针,优化检测体系及反应条件,建立一步法RT-q PCR方法。利用登革热、森林脑炎病毒、肠道病毒71型(EV71)、柯萨奇病毒A16型(Cox A16)、狂犬病毒培养物和临床诊断为登革热及手足口病人的血清样本检测其交叉反应。选择15例疑似脑炎症状的病人血清样本,以国家食品药品监督管理总局(CFDA)批准的乙脑病毒检测试剂盒作对照试剂盒,检测其临床适用性。结果所建立的乙脑病毒一步法RT-q PCR检测方法重复性试验Ct值的变异系数CV在0.46%~0.53%之间,最低可检出5 copies/反应样本。检测体系与登革热、森林脑炎病毒等黄病毒及EV71、Cox A16、狂犬病毒培养物等未发现交叉反应;64份临床诊断为登革热和手足口病人的血清样本检测也均为阴性。15份疑似乙脑感染的病人血清样本的检测结果与国家食品药品监督管理总局批准的乙型脑炎病毒检测试剂盒检测结果一致,但本方法操作步骤更少,检测时间更短。结论本实验建立的乙型脑炎病毒一步法实时荧光RT-q PCR检测方法具有较高灵敏度、特异性,可用于乙型脑炎病毒的检测。

摘要：在配电网规划中引入网格化理念,是配电网的规划、建设、运行、管理与城乡空间规划的无缝衔接,有利于提高配电网规划质量和运行管理水平,有利于配电网的精准投资和精益管理。结合配电网网格化规划的相关指导原则,本文分析配电网与城乡空间规划的层级结构特征,提出了配电网网格划分的“三要素”法,即结合自然地理要素、社会经济要素和电网要素,快速识别网格界线,合理划分网格,达到配电网网格与城乡空间规划的有效结合。通过案例实践,具有一定的合理性,可供相关研究参考。

摘要：配电网是国民经济和社会发展的重要公共基础设施,在"美丽浙江""特色小镇""乡村振兴"等城乡建设项目推进的背景下,提供适应区域发展的配网规划显得尤为重要。基于配电网规划面临的新环境,本文提出了紧密结合城乡相关规划而编制配电网空间布局规划的方法,并以浙江某地为例,从负荷的空间预测热力分布、市政项目的空间推进、配电工程及设施的空间布局等多方面、多角度,介绍着眼全局、立足围观的配电网空间布局规划编制方法。

摘要：“十四五”是我国实现碳达峰的关键时期,光伏产业面临着历史性发展机遇。太阳能光伏的应用有利有弊,需要在发挥其优势的同时解决其中的弊端。当前最重要的是做好光伏电站的安全管理工作,以维护系统的安全性和稳定性,使其朝着正确的方向发展。

摘要：深能高邮东部风电场主体工程包括升压站主体工程、140米混合塔筒工程、137米超高柔塔工程以及场区集电线路进场道路工程。作为国内第一个批量应用超高风电机组的工程,施工场区地质复杂,为典型河网水乡地带,同时工程建设目标为“确保行业优质工程,力争国家优质工程”。针对本工程特点,项目指挥部在施工管理方面,从合同、技术和安全质量管理措施方面进行了创新与实践,高速高效高质量地完成了工程建设,为推进东部平原低风速地区风能资源开发利用及类似风电场工程的施工建设提供了借鉴,形成了明显的示范效应和公司品牌推广作用。