摘要：目的:构建小鼠原始生殖细胞(PGCs)报告基因系统。方法:根据CRISPR基因编辑技术结合同源重组原理,针对鼠Prdm1和Dppa3基因的翻译起始位点ATG附近位置分别设计一对sgRNA,并根据Cas9切割位点以及拟插入目的片段构建相应的用于同源重组的供体质粒,将sgRNA与Donor质粒同时转染入小鼠胚胎干细胞(ESCs)中,并利用质粒携带的抗性基因筛选出目标单克隆细胞,并进行基因型鉴定。结果:通过提取单克隆细胞的基因组DNA进行基因型鉴定,PCR和Sanger测序结果显示,单克隆细胞的基因组中,Prdm1和Dppa3基因翻译起始位点后分别成功插入eGFP和mCherry荧光蛋白编码序列。利用细胞因子诱导eGFP-Prdm1/mCherry-Dppa3mESCs(mouse ESCs)定向分化为mPGCs(mouse PGCs),流式细胞仪检测显示诱导分化的mPGCs特异表达eGFP和mCherry荧光信号。结论:成功构建mPGCs报告基因系统,可用于后续研究mPGCs命运决定的分子机制,对于研究小鼠早期胚胎发育过程具有重要意义。

摘要：目的:利用CRISPR/Cas9技术构建ALF转录伸长因子4(AFF4)基因敲除的小鼠黑色素瘤细胞(B16-F10),自主制备特异的AFF4多克隆抗体。方法:设计一对分别靶向小鼠Aff4基因第3个外显子和第4个内含子的向导RNA(sgRNA)。将构建成功的重组质粒转染至B16-F10细胞中,并利用抗性筛选出单克隆细胞,进行基因型鉴定和AFF4表达水平检测。验证自主制备的AFF4多克隆抗体的特异性。结果:通过基因组DNA鉴定获得两株正确的单克隆细胞系,其Aff4基因mRNA水平(t=53.08,P<0.001)和AFF4蛋白表达水平(t=15.17,P<0.001)显著降低。免疫共沉淀实验和蛋白免疫印迹实验证明自主制备的抗人/鼠AFF4多克隆抗体特异性良好(t=264.7,P<0.0001)。结论:成功构建了Aff4基因敲除的B16-F10稳定细胞系,并且成功制备抗AFF4蛋白的多克隆抗体。

摘要：目的探讨腕背穿支形态学特征,为腕背穿支蒂V-Y推进皮瓣设计提供解剖学基础。方法自2017年8月至2018年10月,选用30侧经动脉内灌注红色乳胶的成人手标本,手术放大镜下重点解剖观测:①腕背穿支的起源、走行、分支与分布。②腕背穿支与前臂、掌背血管网的吻合特点。结果腕背侧血管网分为深层血管网(骨关节网)和浅层血管网(筋膜皮肤网)。前者位于伸肌腱深面,主要由桡动脉腕背支、骨间前动脉腕背支、掌深动脉弓发出的腕背穿支升支、尺动脉腕背支组成;后者位于腕背中部伸肌腱表面,主要由桡动脉腕背支、尺动脉腕背支、骨间前动脉腕背支、骨间后动脉的桡、尺侧肌皮支,以及腕背深层血管网向浅层发出的穿支组成。其中自指伸肌腱尺、桡侧穿出的穿支恒定出现,穿出后分上行支、下行支和侧支,并与前臂、掌背穿支血管的形成吻合;外径分别为(0.7±0.3)mm和(0.6±0.2)mm,长度分别为(1.1±0.4)cm和(0.9±0.4)cm。结论以腕背穿支为蒂可形成V-Y推进皮瓣,可用于修复腕背周围软组织缺损。

摘要：目的探讨半膜肌腘窝穿支的解剖学特征,为临床膝周软组织缺损的修复提供形态学依据。方法在30侧动脉内灌注红色乳胶的成人下肢标本上,通过显微解剖、摹拟手术等方法,重点观测:①半膜肌营养血管的起源、走行、分支与分布;②半膜肌腘窝穿支与邻近穿支的吻合特点。结果半膜肌腘窝穿支于胫骨髁上13.5 cm由半膜肌肌支发出,穿过深筋膜至皮下,并分出众多的细小血管与腘动脉直接皮支、腘窝内侧皮动脉吻合。外径和长度分别为(0.7±0.3)mm、(1.1±0.4)cm。结论以半膜肌腘窝穿支为蒂设计皮瓣,可转位或V-Y推进修复膝周软组织缺损。

摘要：从中频逆变技术现状、中频逆变电源原理出发,提出并设计出了基于DSP(Digital Single Process)的大功率中频逆变电阻焊电源控制电路。实验验证了此设计方案的可行性和优越性,即控制电路简化、器件少、体积小、降低了成本、短路保护动作可靠,满足性能指标的要求,提高了系统的控制精度等优越性。

摘要：采用某一单独的控制芯片已不能实现数字化电阻焊机的数字控制及多任务,本文针对此问题提出了将ARM、DSP和CPLD相结合的电阻焊机主控制器设计方案,并在ARM开发板上构建Linux平台以支持焊机的多任务实现。然后在已建立的系统环境下,实现了焊机和PC机的网络通信,从而使互联网中任何一台PC机对焊机进行访问和控制成为可能。

摘要：目的 探讨足底动脉弓足背穿支形态学特征，为足底弓足背穿支皮瓣设计提供解剖学基础。方法2015年11月至2016年3月，选用25侧经动脉内灌注红色乳胶的成人足标本，以第1跖骨底和第5跖骨粗隆为标志．手术放大镜下重点解剖观测：①足底弓足背穿支的起源、走行、分支与分布。②足底弓足背穿支与足背动脉网吻合特点。另1侧灌注红色乳胶的新鲜标本进行摹拟手术设计。结果足底弓足背穿支共有3支，穿过第2～4骨问背侧肌两头间至足背分为升、降两支，升支与足背网吻合、降支延续为2～4跖背动脉。足底弓第1～3足背穿支起始外径分别为（1．5±0．3）mm、（1．1±0．4）mm、（0．9±0．3）mm，干长分别为（1．1±0．2）cm、（1．5±0．1）cm、（1．5±0．5）cm。结论以足底弓足背穿支为蒂，可形成足背皮瓣转位或V—Y推进修复足背或前足部软组织缺损。

摘要：探讨掌深弓手背穿支蒂筋膜皮瓣修复指蹼区皮肤软组织缺损的临床疗效。方法2010年10月—2018年9月,上海交通大学医学院附属新华医院(崇明)收治11例手背远端指蹼区皮肤软组织缺损患者(男7例、女4例,年龄18~73岁),缺损面积为2.5cm×1.5cm^6.0cm×2.5cm。根据掌深弓手背穿支的起源、走行、分支与分布和掌深弓手背穿支与腕背、掌背血管网的吻合解剖学特点,于患手手背设计掌深弓手背穿支蒂筋膜皮瓣转位修复手背远端指蹼区缺损创面,本组患者皮瓣切取面积为3.5cm×2.0cm^6.5cm×3.0cm。供区直接拉拢缝合或以游离患侧前臂全厚皮覆盖。术后随访3~36个月,评估患者创面修复疗效和皮瓣早期、后期肿胀程度。结果11例患者皮瓣术后全部顺利成活,供受区创面愈合。术后随访3~36个月,皮瓣存活良好,形态较佳,色泽弹性与周围正常皮肤接近,皮瓣两点辨别觉距离为7~10mm,感觉功能恢复均为S3级;供区创面无感染,愈合后瘢痕较小。根据疗效评价:满意8例、一般3例、无不满意。皮瓣肿胀程度评价:早期,Ⅰ度7例、Ⅱ度2例、Ⅲ度2例;后期,Ⅰ度8例、Ⅱ度2例、Ⅲ度1例。手部掌指关节和指间关节活动基本正常,患者对治疗效果满意。结论以掌深弓手背穿支为蒂,形成掌深弓手背穿支蒂筋膜皮瓣转位修复手背远端指蹼区皮肤软组织缺损创面,疗效可靠,具有临床推广价值。

摘要：目的探讨虎口掌侧动脉背侧穿支形态学特征,为虎口掌侧动脉背侧穿支皮瓣设计提供解剖学基础。方法用30侧灌注红色乳胶的成尸手标本,通过巨微解剖、血管铸型等方法,重点观测:①虎口背侧营养血管的起源、走行与分布;②虎口掌侧动脉背侧穿支与虎口背侧血管的吻合特点。另1侧灌注红色乳胶的新鲜标本进行摹拟手术设计。结果虎口背侧血供属多源性,由虎口掌侧动脉(示指桡掌侧固有动脉、拇指尺掌侧固有动脉)背侧穿支和虎口背侧动脉(第1掌背动脉)分支供养。①第1掌背动脉恒定起自桡动脉,走行于第1掌骨间隙,分出桡侧、尺侧和中间3个终支,有桡神经浅支发出的同名指背皮神经伴行;②虎口掌侧动脉向虎口背侧发出尺侧、中间和桡侧穿支,与第1掌背动脉分支形成恒定的吻合,营养虎口背侧皮肤。结论以虎口掌侧动脉背侧穿支为蒂,可形成跨区域供血虎口背侧皮瓣转位修复示指近侧段、鱼际部和拇指软组织缺损。

摘要：目的探讨穿支蒂足背中间皮神经营养血管皮瓣修复前足软组织缺损的可行性。方法采用回顾性病例系列研究分析2013年2月～2017年1月收治的7例前足软组织缺损患者。其中男5例，女2例；年龄18～73岁，平均38岁。损伤部位：前足底外侧皮肤缺损3例，第3趾蹼背侧皮肤缺损2例，第4足趾近节背侧皮肤缺损2例。缺损面积2．5cm×1．5cm～4．5cm×2．0cm。根据术式解剖学基础，在足背外侧设计并切取穿支蒂足背中间皮神经营养血管皮瓣转位修复前足创面。记录手术时间及术中出血量。术后常规观察皮瓣感觉、外观、质地、术区血供、皮瓣成活情况及皮瓣是否存在臃肿、增生性瘢痕、瘙痒、皮肤移植区麻痹等。术后运动功能恢复情况采用美国足踝外科协会（AOFAS）评分。结果手术时间1．0～1．5h，平均1h；术中出血量30～100ml，平均50ml。7例穿支蒂足背中间皮神经营养血管皮瓣全部成活，创面Ⅰ期愈合。经过2～15个月随访，皮瓣两点辨别觉为9～15mm，平均12．5mm。皮瓣质地优良，不臃肿，色泽接近正常，外观较好，术后足部未发生骨质吸收、创面感染、肌腱粘连、局部留有线条或片状瘢痕等并发症，下肢行走功能无障碍，供、受区未发现穿鞋不适。患足AOFAS评分95～98分，患者对供、受区功能和外形满意。结论穿支蒂足背中间皮神经营养血管皮瓣具有术后皮瓣成活率高、外形满意、术区恢复快等特点，且无明显足部疼痛、关节活动受限等并发症，是修复前足软组织缺损创面的可靠方法。