摘要：建立正品水蛭(宽体金线蛭、日本医蛭)的DNA分子鉴别方法。基于线粒体细胞色素c氧化酶亚基Ⅰ(COⅠ)基因序列,分别设计了针对宽体金线蛭和日本医蛭的特异性引物,将其应用于水蛭药材正品、常见伪品菲牛蛭以及含水蛭的中成药脑心通胶囊的PCR技术检测。结果显示单独使用引物WF1R2或WF2R2均可以特异性扩增宽体金线蛭的DNA,产生大小为200 bp左右的条带;而引物HF1R2则可以特异性扩增日本医蛭,产生大小为142 bp的条带;这3对引物在伪品菲牛蛭中均无扩增条带。且用引物WF1R2和WF2R2均在脑心通胶囊中检测到宽体金线蛭,与胶囊所用投料药材一致。结果表明这3对引物可以分别对宽体金线蛭和日本医蛭进行特异性鉴别,且无需测序;而引物WF1R2和WF2R2可直接用于脑心通胶囊中所用水蛭正品的检控。该DNA分子鉴定方法简便、准确,特异性强且灵敏度高,可作为对传统基原鉴定方法的补充,进一步提高水蛭药材及含水蛭的中成药脑心通胶囊的质量控制水平。

摘要：目的建立正品全蝎(东亚钳蝎)的特异性DNA分子鉴别方法。方法采用DNA条形码技术,基于线粒体细胞色素c氧化酶亚基Ⅰ(COⅠ)基因序列,设计全蝎的特异性引物,对全蝎药材及含全蝎的中成药脑心通胶囊进行PCR扩增及测序,将获得的序列在GenBank数据库中应用BLAST进行结果判定,结果中相似性最高的序列对应物种为待测样品最接近的物种。结果引物SF1R1和SF2R4均可特异性扩增东亚钳蝎的DNA,产生大小为250~260 bp的条带;且应用这两对引物均在脑心通胶囊中检测到东亚钳蝎,与胶囊所用投料药材一致。结论基于COⅠ序列的DNA条形码技术可用于全蝎药材及脑心通胶囊中全蝎的鉴定,该方法准确、简便、具有高特异性和灵敏度,具有实际应用价值。