摘要：目的本研究通过设计一套直观、实用性强、符合实验室菌种管理制度要求的菌种管理系统,提高实验室菌种管理水平。方法采用eclipse作为开发工具,利用Java语言进行编程并通过MySQL进行数据库的管理,按照实验室菌种管理制度要求,建立能够满足实验室需求的菌种管理系统。结果自主开发出了一套实验室菌种管理系统。实现了菌种入库档案建立;菌种出库申请、审核、外送、归还以及销毁流程控制;菌种查找,统计,记录查询,传代提醒等功能。结论该菌种管理系统,现已在实验室投入使用,运行情况稳定,反映良好,有效提高了实验室菌种管理水平,达到了预期目的。

摘要：目的建立分子信标荧光定量PCR检测结核分技杆菌的最佳反应体系，探讨影响分子信标荧光定量PCR扩增结果的多个因素。方法利用单因素法和正交实验法，从MgCl2，引物，分子信标探针，dNTP，Taq DNA聚合酶5种因素对分子信标荧光定量PCR反应体系进行优化，并对这两种方法所得的最优体系进行比较。结果单因素法得到的最优反应体系（25μl）为：4mmol／L MgCl2，上、下游引物各0．3μmol／L，分子信标探针0．1μmol／L，200μmol／L dNTP，2U Taq DNA；正交法得到的最优反应体系（25μl）为：6mmol／L MgCl2，上、下游引物各0．2μmol／L，分子信标探针0．1μmol／L，100μmol／L dNTP，3U Taq DNA聚合酶，正交法得到的最优反应体系的荧光定量PCR扩增曲线形状更好，Q值较小，△Rn较大。结论采用正交法得到的荧光定量PCR反应体系优于单因素法，进行实时荧光定量PCR反应体系优化时，正交实验设计是一条科学、可靠、高效、快捷的途径。

摘要：目的建立荧光定量PCR方法,用于检测军团菌属特异性16S rRNA基因,并探讨广州地区军团菌属感染状况。方法利用军团菌属特异性16S rRNA基因保守序列设计引物和探针,优化反应条件和反应体系,对嗜肺军团菌、非嗜肺军团菌及其他细菌进行检测,验证该方法的特异性、敏感性、重复性,对广东省中医院采集的532例肺部感染患者痰液标本进行检测。结果该方法检测军团菌属所有标准菌株均出现阳性信号,其他非军团菌属细菌检测结果均为阴性;检测灵敏度为102CFU/ml,临床检测532例肺部感染患者的痰液标本,荧光法检出军团菌阳性43例,阳性率为8.08%,16S rRNA PCR法加基因测序验证阳性率为7.71%,两者检测结果差异无统计学意义,表明其具有较好的符合性和等效性。结论 16S rRNA基因荧光定量PCR法检测患者痰液标本中军团菌属,具有快速、敏感、特异等特点,适用于临床军团菌属感染调查及快速检测。