摘要：为了探索和建立奶山羊胎儿成纤维细胞体外分离培养及性别鉴定的技术方法,获得转基因克隆羊的供体细胞,本试验用组织块培养法分离纯化得到两株奶山羊胎儿成纤维细胞系,进行细胞形态观察、生长曲线及细胞周期和倍性分析。同时根据GenBank上发布的山羊SRY基因设计合成一对PCR引物作为性别鉴定引物,另外根据山羊BLG基因序列设计一对引物作为内参引物,建立PCR反应体系对两株胎儿成纤维细胞系进行性别鉴定。结果表明,分离的胎儿成纤维细胞活力良好,可在体外快速生长、增殖、稳定培养;阳性对照和山羊胎儿成纤维细胞系2经PCR扩增得到337 bp片段和498 bp的BLG基因片段,而阴性对照和山羊胎儿成纤维细胞系1经PCR扩增得到498 bp的β-乳球蛋白基因片段。将337 bp片段和pMD19-T载体连接,构建重组载体pSRY,通过测序证明337 bp片段为SRY基因片段。这说明有337 bp扩增带的细胞系为雄性,无337 bp扩增带的细胞系为雌性。本试验为转基因奶山羊新品种的培育奠定了基础。

摘要：根据已知的BLG序列设计引物,通过PCR技术克隆同源臂序列,5′端同源臂2 264bp,包括外显子1,3′端同源臂4 461bp,包括全部的外显子3、4、5、6、7,分别连入克隆载体pMD18-T Simple载体中并测序。然后以含有正负筛选标记基因的ploxpⅡ载体为基础,将5′端和3′端同源臂片段先后连入其中,进行酶切、PCR鉴定。将构建好的基因敲除载体转化组成型表达Cre重组酶的大肠杆菌BM25.8,验证Loxp位点的活性。结果表明,构建了奶山羊BLG基因第2外显子缺失的基因敲除载体pBLG2T,且pBLG2T载体中的正选neo基因可以被Cre重组酶去除。为获得BLG 1条等位基因缺失型细胞株以及培育高产优质奶山羊新品种奠定基础。

摘要：目的探讨髋臼骨折并骨盆骨折患者行手术治疗前应用3D技术打印出骨折模型在手术方案制订中的应用价值。方法6例髋臼骨折并骨盆骨折患者，均于术前行螺旋CT扫描并进行三维重建，应用3D技术打印出骨折模型，依据骨折模型设计手术方案，记录手术入路、选用内固定钢板长度、螺钉数量长度及手术时间等。结果依据1：1比例打印出来3D骨折模型，设计手术采用髂腹股沟联合Kocher-Langenbeck入路，选用5～14孔骨盆弧形钢板1～3个，钢板弧度25°～72°，螺钉数量6～16个，螺钉拧人选择避免进入髋臼内尤其紧贴髋臼关节边缘的方向；6例实际手术时间（97±48）min，术中出血量（200±95）mL，手术入路与术前设计一致，所用5～14孔骨盆弧形钢板数量、弧度，螺钉数量及螺钉拧入方向与设计手术方案完全一致；术后第2天复查x线片及CT，显示骨折复位及内固定满意、无关节腔内穿人螺钉，Matta评估均为优。结论在髋臼骨折并骨盆骨折术前应用3D打印技术制订手术计划，可使手术更加精确和个性化，提高了复杂高难度手术的成功率。