摘要：背景:骨形态发生蛋白(bonemorphogeneticprotein,BMP)是诱导和促进种子细胞向骨细胞方向转化的最重要的细胞因子之一。天然BMP难溶解于培养基,对培养的种子细胞无法有效发挥作用;可溶性重组BMP虽可溶解于培养基,但价格昂贵,而且难于适时、适量的作用于种子细胞。基因治疗为上述问题的解决提供了新的思路。目的:转染外源BMP-3基因入成纤维细胞,筛选获得稳定表达BMP-3的阳性成纤维细胞克隆。设计:单一样本研究。单位:解放军第四军医大学西京医院全军骨科研究所。材料:成纤维细胞(NIH3T3细胞)由第四军医大学口腔医学院司徒镇强教授提供。方法:2000-04/2003-11在全军重点实验室第四军医大学全军骨科研究所实验室完成。采用脂质体转染的方法将外源BMP-3基因转染入NIH3T3细胞,G418筛选后寻找细胞集落,分离、培养,免疫组织化学鉴定,BMP-3染色阳性者为阳性BMP-3表达细胞克隆。主要观察指标:①NIH3T3细胞筛选浓度。②转染阳性细胞克隆的筛选。③筛选的细胞克隆内BMP-3的表达。结果:成功将BMP-3基因转染入NIH3T3细胞,经免疫组化筛选出阳性BMP-3表达成纤维细胞的克隆,建立了BMP-3稳定表达成纤维细胞株。结论:将BMP-3基因真核表达载体转染入成纤维细胞,并经筛选获得了可稳定表达BMP-3的成纤维细胞株,为将来骨组织工?

摘要：以消防部队实战需要为背景,在分析建立消防部队可视数字化后援保障系统平台的必要性和可行性的基础上,提出了以实现跨平台信息共享及GIS技术为着眼点的系统设计思路,并阐述了建立基于电子地图的信息管理平台及实现基于专家系统的后援保障辅助决策的系统解决方案。

摘要：目的 对碱性成纤维细胞生长因子（basic　fibroblast growth factor,bFGF）增强重组人骨形态发生蛋白-2（recombinant human bone　morphogenetic protein-2,rhBMP-2）诱导成骨能力的剂量依赖性进行研究。方法280只BALB/c小鼠随机分为8组,每组35只,实验组rhBMP-2的剂量均为0.5mg,bFGF的剂量分别为0、2、10、40、80、300、500活性单位（IU）;设立单纯牛松质骨载体组为对照组。按实验设计,分别将rhBMP-2混悬液及bFGF-PVP溶液与牛松质骨载体充分混匀,负压下真空抽吸,冻干。将复合植骨材料植入小鼠右侧股部肌袋内,各组分别于术后第3、5、7、9、14、21d六个时间点取材,进行组织学、X线分析以及钙含量测定,观察各组的诱导成骨情况。结果（1）bFGF剂量为10～80IU时,间充质细胞增殖、分化,软骨细胞及新生骨形成均早于其它各组,成骨量多于其它各组,组织钙含量明显高于其它各组（P0.05）,提示此剂量bhBMP-2的诱导成骨能力无明显影响。（3）bFGF剂量为500IU时,术后第21d,仅1例标本可见散在的极少量新骨形成。

摘要：目的采用Ⅰ型胶原凝胶悬浮包埋兔脂肪干细胞并复合PLGA-β-TCP支架修复自体桡骨缺损。方法使用Ⅰ型胶原凝胶悬浮兔脂肪干细胞并与PLGA-β-TCP复合构建脂肪干细胞一Ⅰ型胶原凝胶／PLGA-β-TCP复合体（ASCs—COL／PLGA-β-TCP）（A组），同时设立单纯细胞／PLGA-β-TCP材料复合体（ASCs／PLGA-β-TCP）（B组）、单纯Ⅰ型胶原凝胶／PLGA-β-TCP复合体（COIMPLGA-β-TCP）（C组）、单纯PLGA-β-TCP支架材料（D组）以及空白缺损（E组）作为对照，体外成骨诱导培养2周后植入桡骨1．5cm缺损部位。30只兔（60侧）采用两因素随机区组设计每只兔两侧骨缺损植入组别。分别于术后8、16、24周处死兔，取材，进行相关分析。结果术后8周，大体观察、放射学、组织学检测示A组桡骨断端连续性基本恢复。术后16周，A组骨断端连续性完全恢复，髓腔未通。术后24周，A组髓腔再通，改建塑形趋于完成，材料基本降解。自术后16～24周，A组残存材料比例低于其他3组（P〈0．05，n=4）；与A组比较，在整个观察周期内，B、C、D组均无明显成骨现象，E组保持骨缺损状态（P〈0．05，n=4）。结论通过应用Ⅰ型胶原凝胶悬浮包埋脂肪于细胞进而与PLGA-β-TCP多孔支架材料复合构建新型仿生骨组织工程复合体，可修复兔桡骨1．5cm缺损。

摘要：目的 :构建能产生与骨保护素配体 (OPGL)同源的发卡结构小干预RNA (siRNA)的载体并验证其对OPGLmRNA的抑制效应 .方法 :根据大鼠的OPGL的基因序列 ,参考OPGLmRNA的空间结构 ,设计发卡结构siRNA模版 ,并构建由U6启动子引导产生siRNA的质粒载体 .转染大鼠骨髓基质细胞 ,4 8h后提取细胞总RNA ,RT PCR ,以OPGL与内参 β actin扩增产物的吸光度比值来反映OPGLmRNA的表达情况 ,结果进行统计学分析 .结果 :成功获得U6启动子引导产生siRNA的质粒载体 ,转染骨髓基质细胞后细胞中OPGLmRNA的表达量随着质粒载体量的增加而减少 .结论 :U6启动子引导产生siRNA的质粒载体能有效地减低OPGLmRNA的表达量从而抑制OPGL的表达 .

摘要：背景:异种骨移植免疫排斥反应是影响预后的主要问题。然而,对异种骨移植中免疫因子表达和调节的认识尚少。白细胞介素1,白细胞介素6和肿瘤坏死因子α是重要的免疫因子,与移植后排斥反应密切相关。目的:观察异种骨移植局部白细胞介素1、白细胞介素6和肿瘤坏死因子αmRNA和蛋白质的表达,并探索转化生长因子β对这些免疫因子的调节作用。设计:随机对照实验。单位:解放军第四军医大学西京医院骨科研究所。对象:雄性Balb/c小鼠72只,体质量20～25g,随机分为3组,复合松质骨载体组,单纯松质骨载体组和空白对照组,每组24只。方法:实验于2003-06/2004-06在解放军第四军医大学西京医院骨科研究所完成。复合松质骨载体组小鼠左侧股部肌间隙植入复合转化生长因子β的松质骨载体;单纯松质骨载体组植入单纯松质骨载体;空白对照组仅行手术,不植入材料。术后4,7,14和21d观察各组小鼠植骨或手术区周围组织中增殖细胞记数;应用原位杂交和免疫组化技术检测植骨局部多种免疫因子的表达。主要观察指标:各组小鼠移植骨局部组织学观察及细胞密度测定;移植骨局部白细胞介素1α,白细胞介素6和肿瘤坏死因子αmRNA和蛋白质的表达。结果:①各组小鼠移植骨局部组织学观察及细胞密度测定:7d时,复合松质骨骨粒组较单纯牛松质骨骨粒组增殖组织中细胞密度明显高[(470.63±132.89),(311.46±93.69)个/视野,P0.05)。结论:在异种骨移植局部,多种细胞可以表达白细胞介素1α,白细胞介素6和肿瘤坏死因子αmRNA和蛋白质,且这种表达受到转化生长因子β的调节。提示了转化生长因子β调节异种骨移植免疫的一种方式。

摘要：背景:骨保护素(osteoprotegerin,OPG)可抑制破骨细胞的分化,抑制成熟破骨细胞的骨吸收活性并诱导其凋亡,在骨质疏松、类风湿性关节炎、癌症骨转移的领域有潜在的应用价值。目的:鉴定在CHO细胞中表达的人骨保护素生物学活性。设计:随机对照的实验研究。地点和对象:实验在解放军第四军医大学西京医院骨科研究所完成,研究对象:人骨肉瘤细胞株MG63、中国仓鼠CHO细胞株、克隆质粒pUC19及真核表达质粒pcDNA3为本室保存,12只6～8周龄BABL/c雄性小鼠由本校动物中心提供。干预:RT-PCR法获得人OPG编码区cDNA并构建真核表达载体,在脂质体介导下转染CHO细胞,经Westernblot鉴定筛选稳定表达OPG的细胞系。获取含有OPG蛋白的条件培养基浓缩液,实验组:体外培养的鼠破骨细胞培养基中加入含有OPG蛋白的条件培养基浓缩液。对照组1只加入转染pcDNA3空载体的CHO细胞培养基的浓缩液。对照组2只加入完全培养基。主要观察指标:观察人OPG对破骨细胞的分化和骨吸收的影响。结果:转染人OPG编码区基因的CHO细胞能分泌表达OPG。小鼠骨髓细胞在1α,25(OH)2D3(1×10-8mol/L)的存在下可稳定分化出具有骨吸收功能的破骨细胞样细胞,在该培养体系中加入含有OPG的CHO细胞培养上清浓缩液,TRAP染色阳性细胞数明显减少(t=5.547,P<0.01)。

摘要：声学超材料是一种新型的声学介质,它通过设计结构来实现天然材料所不具备的物理特性,获得人们所期待的超出常规的声学属性。在声学应用中,超材料经常被设计出各种结构以实现声波调控的目的。由于具有结构灵活、设计性强和超出自然材料的优异性能等优点,声学超材料受到了广泛的关注,也成为声学领域的一个热门研究方向。本文针对声场增强型声学超材料,结合超材料声学传感技术的研究发展,介绍了几种具有代表性的研究成果,主要包括基于F-P共振型声场增强、Mie共振型声场增强的声学超表面和渐变型声场增强的声学超材料。简述了它们的基本原理和功能特点,并对声场增强型声学超材料的应用前景进行了展望。

摘要：以三氯化铁和尿素为原料制备氢氧化铁溶胶。根据初步实验结果,确定了影响溶胶的四个主要因素,设计了正交实验,根据产品外观,在520nm处的吸光值,用十二烷基苯磺酸钠沉淀所得重量,确定了溶胶的最佳条件。

摘要：目的构建基于脂肪于细胞、Ⅰ型胶原凝胶以及聚乳酸聚乙醇酸-β-磷酸三钙支架（PLGA-β-TCP）的骨组织工程复合体并对其异位成骨进行研究。方法设计构建脂肪干细胞-Ⅰ型胶原凝胶／PLGA—β—TCP复合体（A组），同时设立单纯细胞／PLGA—β—TCP材料复合体（B组）、单纯Ⅰ型胶原凝胶／PLGA-β-TCP复合体（C组）以及单纯PLGA-β-TCP支架材料（D组）作为对照。扫描电镜、相差显微镜观察细胞材料复合情况并对脂肪干细胞增殖以及成骨分化进行分析。体外成骨诱导培养2周后移植于自体股部肌袋，8周后取出，依次行放射学、组织学定性及半定量分析。结果（1）体外成骨诱导2周，A组细胞增殖率慢于B组（P〈0．05，n=4），但其细胞总数远高于后者（P〈0．01，n=4）。A组碱性磷酸酶（ALPase）活性、细胞外基质矿化程度均显著高于B组（P〈0．01，n=4）。A组细胞悬浮于Ⅰ型胶原凝胶并均匀分布于材料孔隙中而B组细胞仅见黏附于材料表面。（2）移植8周，X线片示A组高密度钙化影形成，B、C、D组未见有阳性结果。A组材料孔隙中均匀充满新生骨组织，可观察到骨小梁样结构。B组仅在少数孔隙中有类骨组织形成，同时伴有结缔组织长入。A组新生骨面积百分比显著高于B组（P〈0．01，n=4）。结论通过应用Ⅰ型胶原凝胶来实现脂肪干细胞与PLGA-β-TCP多孔支架材料的均匀复合，能够有效促进脂肪干细胞在材料孔隙中的成骨分化及均质骨组织形成。