摘要：PCR产物的高通量测序被广泛应用于功能基因筛选、肿瘤相关基因的突变和甲基化检测等。在高通量测序技术中,建库和上机测序实验一直是决定最终DNA数据质量的关键。作者优化了PCR产物样品的DNA文库制备条件和体系,设计了适合PCR产物特点上机测序方法,将已建库的PCR样品中混入一定量的基因组标准品后再上机测序,由此保证了测序数据的高质量和低冗余度。为低多样性DNA样品高通量测序技术方法运用提供方法上的参考。

摘要：概述近年来含氰基拟除虫菊酯类农药残留免疫检测方法,总结各种含氰基拟除虫菊酯半抗原的设计,以及所达到的检测限,讨论有待于进一步研究的内容;简述正在进行的有关含氰基拟除虫菊酯类农药多残留免疫检测方法的研究内容。

摘要：目的快速检测湖水中的双酚A二环氧甘油醚。方法试验设计一种新型双酚A二环氧甘油醚半抗原,并成功与载体蛋白偶联,经过小鼠免疫、细胞融合技术和三次亚克隆等方法,成功筛选出了可以稳定分泌BADGE单克隆抗体的杂交瘤细胞株。结果成功制备了高灵敏度高特异性的双酚A二环氧甘油醚单克隆抗体,可以用于针对双酚A二环氧甘油醚的间接竞争酶联免疫吸附测定(ic-ELISA)。基于单克隆抗体,绘制了标准曲线,结果显示,单克隆抗体的IC50=1.15 ng/mL,检测线性范围IC20~IC80为0.16~8.15 ng/mL。通过加标回收实验,BADGE在湖水的添加回收率均在80%~120%之间。结论双酚A二环氧甘油醚单克隆抗体在实际湖水样品检测中的运用具有可行性。

摘要：实验选用了逆相蒸发法制备PST脂质体。研究了有关单一因素对脂质体包封率的影响 ,并在此基础上应用均匀设计实验 ,结合计算机优化PST脂质体处方和工艺 ,最终确定了脂质体的配方和工艺。确定配方为 :磷脂和胆固醇的比例 7∶3;VE 和磷脂比例 15∶10 0 ;PST和磷脂比例 1∶2 5 ;海藻糖含量 2 .5 % ;PBS 4 0mL ;蒸发温度 38℃。

摘要：采用重氮化法将盐酸克伦特罗 (CL)与牛血清白蛋白 (BSA)交联 ,用紫外扫描和凝胶电泳对交联物鉴定后免疫新西兰纯毛白兔 ,制备抗血清。经鉴定 ,抗血清中含有针对CL的抗体 ,效价为 3.2× 10 5;以此抗体为基础 ,设计了间接酶联免疫法 ,该法的检出限为 0 .0 96ng/mL ,对加于尿液、血液和组织中CL的回收率为 80 %～ 12 0 % ;通过重复性、灵敏度、准确性等指标对该法进行了评估 ,并与高效液相层析 (HPLC)及国外进口试剂盒进行了比较 ,表明该法的各项参数均能满足实际检测的需要。

摘要：设计间接竞争ELISA方法,并优化二抗稀释比、竞争时间、PBS溶液的pH值3个条件参数。优化后的地塞米松、倍他米松、双氟米松3种抗体的间接竞争ELISA曲线的IC50分别为2.66、7.36、6.12ng/ml。通过3种抗体的交叉反应来评估其群选特性。结果表明,地塞米松抗体的群选性最强,对双氟米松的交叉反应率高达120%、倍他米松73%、曲安息龙37%、泼尼松龙21%,而对其他3种内源性类糖皮质激素交叉反应率均小于0.1%,然后地塞米松以0.375、0.75、1.5、3.0ng/g分别添加到鸡肉样本中测定回收率,所得回收率在61.3%～80.3%之间,变异系数小于15%。在实际样本检测中,将ELISA方法的测定结果与LC-MS的结果进行比较,两者具有很好的相关性。

摘要：建立牛奶中残留麻保沙星的微生物学检测方法。试验以金黄色葡萄球菌为敏感菌,采用滤纸片法进行测定,以牛奶为样设计了添加回收试验以证实该方法的有效性。磷酸盐缓冲溶液和牛奶基质麻保沙星标准曲线的工作范围是0.1~1.6μg/mL,最低检测限为0.1μg/mL。对纯牛奶样的3种添加水平,平均回收率范围在77.3%~93.3%之间,变异系数小于7.26%,该方法可以用于牛奶中麻保沙星残留的检测。