摘要：膜蛋白在生物体内承担细胞内外环境物质和能量的交换及信息传递,也是药物设计的靶标。在家蚕蛋白质数据库中筛选到一个含有6个跨膜区的膜蛋白,包含一个主要协助转运蛋白超家族(MFS)的保守结构域,将该蛋白质的编码基因命名为BmMFS。荧光定量PCR检测家蚕5龄幼虫不同组织中的BmMFS转录水平存在明显差异,在中肠中的转录水平最高,在气管中的转录水平最低。以家蚕蛹cDNA为模板扩增BmMFS片段,构建重组质粒pET-32a-Ph20-BmMFS,在Ph20和BmMFS序列之间引入凝血酶(thrombin)酶切位点;转化*** Rosetta,以1 mmol/L IPTG诱导融合基因表达,菌液调节pH初步纯化后进一步通过镍柱亲和层析纯化目的蛋白质,经Western blotting和质谱鉴定获得的融合蛋白为Ph20-BmMFS;进一步利用家蚕杆状病毒表达系统构建重组病毒(vPh20-BmMFS)并感染BmN细胞,Western blotting检测显示融合BmMFS蛋白成功表达。将家蚕膜蛋白基因与家蚕杆状病毒多角体蛋白基因片段Ph20融合表达,提高了膜蛋白在原核和真核表达系统中的表达量,利用该多角体蛋白能在较低pH条件下溶解的特性简化了融合蛋白纯化过程。