摘要：背景:蝰亚科、蝮亚科和眼镜蛇科等蛇毒中存在着一类能直接溶解纤维蛋白(原)的酶,称为纤维蛋白(原)溶酶(纤溶酶),可做为溶解在心肌梗死、中风等期间形成的血栓的抗栓药物。目的:分离纯化江浙蝮蛇毒纤溶酶,并分析其部分生物化学和药理性质。设计:对照观察实验。单位:广西医科大学蛇毒研究所。材料:实验于2003-07/2005-06在广西医科大学蛇毒研究所完成。昆明种小鼠,体质量18～25g,平均(20±2)g,鼠龄三四个月,由广西医科大学实验动物中心提供。蛇毒冻干粉由广西医科大学蛇毒研究所提供。方法:应用DEAESepharoseCL-6B阴离子交换柱和HiPrepSephacrylS100柱分离纯化纤溶酶,以高效液相色谱仪和聚丙烯酰胺凝胶电泳检测纯度、相对分子质量,应用等电聚焦电泳测定等电点,然后测定氨基酸组分及部分药理性质。主要观察指标:纤溶酶相对分子质量、等电点和氨基酸组成,抑制剂对纤溶酶的作用,出血活性实验,纤溶酶对家兔体内抗凝活性的作用。结果:纳入30只鼠和12只兔全部进入结果分析。分离得到相对分子质量为59100,等电点为4.98,SDS-PAGE为一条带,高效液相色谱分析为单一峰的纤溶酶。该组分属于金属蛋白酶类。氨基酸组成分析表明它含较多的酸性氨基酸。有微弱的出血毒性。具有较强且持久的溶栓效果。结论:分离纯化得到了一种有微弱出血毒,具有较强抗凝活性的单一组分的酸性金属蛋白酶。

摘要：目的　研究广西眼镜王蛇毒杂合性酸性磷脂酶A2 (APLA2 )的基因克隆与序列分析 .方法　从广西眼镜王蛇毒腺中提取总RNA ,根据种属关系接近的台湾眼镜蛇毒APLA2 两端非翻译区的保守序列设计引物 ,利用RT -PCR进行体外扩增 ,获得磷脂酶A2 基因 ,克隆至pMD18-T载体 ,经测序筛选出APLA2 - 1,APLA2 - 2及一个新的酸性磷脂酶A2 (命名为APLA2 - 3 ) .根据测序结果确定了APLA2 - 3基因的全序列 ,并由此推导编码的氨基酸序列 .结果　利用Antheprot4 3c蛋白质序列分析软件包计算它的等电点为 4 885 ,相对分子质量为 16 5 43kD ,并预测了它的二级结构和部分理化性质 .同源性比较表明 ,APLA2 - 3的 1～ 3 9位氨基酸残基序列与APLA2 - 2相同 ,其同源性为 64 % ,而 40～ 10 8位氨基酸残基序列与APLA2 - 1相同 ,其同源性为 69% ,10 9位氨基酸残基序列皆不同于这两种APLA2 .结论揭示了APLA2 具有基因多样性 ,可能与物种进化和生物活性有关 ,并为进一步研究PLA2