摘要：自1997年Janeway提出模式识别以来,TLRs作为一类重要的免疫应答参与者,日渐被人们所认知。迄今为止,已有13种TLRs被陆续发现,其在肿瘤免疫、移植免疫、疫苗设计、抗感染和自身免疫病发生发展过程中发挥着重要的作用,尤其在树突状细胞抗感染免疫应答过程中的作用倍受关注,成为免疫学研究的又一个热点。

摘要：目的:克隆牙龈卟啉菌外膜蛋白RagB基因、原核表达并制备牙龈卟啉菌外膜蛋白RagB多克隆抗体。方法:根据牙龈卟啉菌外膜蛋白RagB的DNA序列,设计特异性引物并经PCR扩增其基因。扩增产物经鉴定和测序分析后,与质粒pET-32a(+)重组形成pET-32a-ragB,继而转化大肠埃希菌。IPTG诱导重组蛋白的表达,再通过Ni-NTA亲和层析柱纯化后,用SDS-PAGE电泳和Western blot鉴定;获得的重组蛋白行常规家兔免疫,以制备多克隆抗体,并应用ELISA测定抗体效价。结果:PCR扩增获得编码区全长为1506bp可编码501个氨基酸的RagB基因,测序结果与GenBank公布的序列(AJ130872)完全一致;构建了pET-32a-ragB原核表达载体,获得了高表达的融合蛋白,SDS-PAGE电泳和Western blot表明具有较高的纯度;ELISA结果显示,特异性兔抗RagB的多克隆抗体效价为1×105。结论:在成功构建牙龈卟啉菌外膜蛋白RagB原核表达载体的基础上,高效表达及纯化了RagB融合蛋白,并制备了高效价的多克隆抗体。为进一步开展牙龈卟啉菌疫苗研究、建立牙龈卟啉菌感染的实验室诊断方法奠定了基础。

摘要：铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa，Pa）外膜蛋白F（OprF）的主动免疫能诱发机体产生特异性体液免疫应答，发挥局部保护作用。然而OprF的完整蛋白对机体具有潜在的危害性。现有研究表明OprF蛋白含有大量的B细胞表位，因此，应用OprF优势抗原表位设计的疫苗，既能诱导机体产生抗Pa的中和抗体，又能克服非抗原决定簇成分潜在的毒副作用。考虑到表位蛋白的免疫原性较弱，不足以引发良好的免疫应答，