摘要：目的 联合应用二维液相色谱（two-dimensional liquid phase fractionation,PF2D）及基质辅助激光解吸电离飞行时间串联质谱（matrix-assisted laser desorption ionization time-of-flight/time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF/TOF-MS）技术,筛选多种牙龈卟啉单胞菌（Porphyromonas gingivalis,Pg）共同外膜蛋白（outer membrane protein,OMP）,为针对多种Pg设计具有交叉保护作用的疫苗提供候选靶抗原.方法 超高速离心法提取Pg301、PgATCC33277和PgW83菌株OMP,应用PF2D目标蛋白快速分离系统分离OMP,对比分析得到共同OMP,用MALDI-TOF/TOF-MS串联质谱结合数据库搜索,确定蛋白质一级结构.结果 第一维色谱聚焦分离,3株Pg共获得99个蛋白质样本;选定OMP组分B7,进行第二维反相色谱分离,3株Pg共确定了8个共同的蛋白色谱峰,运用MALDI-TOF/TOF-MS对蛋白样品进行鉴定,结果 确定了其中一个为已知的蛋白精氨酸-牙龈素A.结论 PF2D分离系统分辨率高、重现性好,结合MALDI-TOF/TOF-MS串联质谱技术,可用于鉴定Pg的共同OMP.

摘要：目的:应用RNA干扰技术,以人BIRC5基因为靶基因,设计合成3对短发夹结构的互补DNA序列和一对阴性对照序列,构建慢病毒干扰载体并鉴定。方法:将设计合成的单链引物退火成双链oligo序列,连接入经AgeI和EcoR I双酶切线性化的pMAGic慢病毒质粒载体中,经转化DH5α感受态细胞并筛选出阳性克隆,采用PCR扩增和DNA测序鉴定阳性克隆。结果:PCR扩增产物经凝胶电泳阳性克隆得到335 bp条带,阴性克隆得到298 bp条带,DNA测序结果证实其含设计合成序列。结论:4对BIRC5 shRNA重组慢病毒表达载体构建成功,为研究靶向BIRC5 siRNA对肿瘤细胞增殖抑制与诱导凋亡作用及基因治疗研究奠定了实验基础。

摘要：目的 应用表面增强激光解吸电离飞行时间质谱（surface enhanced laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry,SELDI-TOF-MS）技术筛选多种牙龈卟啉单胞菌（Porphyromonas gingivalis,Pg）共同外膜蛋白（outer membrane protein,OMP）,为针对多种Pg设计具有交叉保护作用的疫苗提供候选靶抗原.方法 应用超速离心法提取PgATCC33277、Pgw83、Pg301和Pg381菌株外膜蛋白,SELDI疏水性蛋白芯片H50检测OMP,Biomarker Wizard软件分析4种菌株OMP质谱图.结果 OMP质谱图显示,PgATCC33277、PgW83、Pg301和Pg381分别有71、74、76和72个蛋白质峰,并存在13种共同OMP 在美国国立生物信息中心蛋白库中鉴定到一种已知蛋白gil116636495,其功能尚不清楚.结论 发现13种共同OMP可作为牙周病疫苗候选抗原,证实基于SELDI-TOF-MS技术适合检测小相对分子质量（＜20000）、低丰度、疏水性蛋白,且操作简单、重复性好,可用于大规模寻找Pg的共同OMP.

摘要：口腔内科学是理论与实践紧密结合的学科。为了使学生在学习过程中能更好地理解理论课讲授的内容，并尽快地将理论应用于实践。我们从1988年开始，按照教学大纲的要求，自行设计，并不断改进和完善、制作了三个系列，分别是《口腔内科系列教具改革》、《口腔内科系列配套教具(二)》、《口腔内科系列配套教具(三)》，共46套配套教具。现将在教学实践中的体会介绍如下。

摘要：目的 :明确一段式单桩螺旋形种植牙的骨组织形态、硬度与应力的关系 ,指导种植体的设计与运用。方法 :模型为皮质骨厚度 1～ 2mm ,种植体与牙槽骨直接相接触。种植体根长 10、12、13、14mm ,直径为 3.6、3.7、3.8、3.9、4.0mm的圆柱形 ,冠高为 4mm和 9mm。加载方式为垂直、45°斜向 45°偏心斜向。力量为 2 0 0N。牙槽骨形态 :用CT垂直于牙合平面取自一无附着丧失、正常牙合形的青年男性下颌第一磨牙、上颌切牙。结果 :骨组织的应力主要发生在皮—松质骨交界区和有最大应力的部位 ,松质骨是应力主要承受区。前、后牙牙槽骨的厚度、形态可影响骨组织的应力大小和分布。结论 :在 4种工况条件下与种植体接触的皮—松质骨交界区始终是骨组织最大应力的部位。种植体周的骨弹性模量越高 ,皮质骨的应力也升高。提高种植体弹性模量可以降低皮质骨和松质骨承变的应力。

摘要：目的 :明确一段式单桩螺旋形种植体的长度、直径、强度、结构与应力的关系并指导种植体的设计与运用。方法 :模型为皮质骨厚度 :1～ 2 mm,种植体与牙槽骨直接相接触。种植体为单桩一段式圆柱形 ,规格为4 mm× 10 mm,3 .9mm× 10 mm,3 .8mm× 12 mm,3 .8× 13 mm,3 .7mm× 12 mm,3 .7× 13 mm,3 .6mm× 14 m m。种植体冠高 4 mm和 9mm。加载方式为垂直、4 5°斜向、4 5°偏心斜向。力量为 2 0 0 N。牙槽骨形态 :用 CT取自一正常牙合形、无附着丧失的青年男性下颌第一磨牙、上颌切牙周围的骨形态。结果 :在载荷一定的情况下 ,除后牙偏心斜向加载外 ,前、后牙种植体自身承受的应力大小与其直径、长度均成反比 ;应力分布范围和大小与受力方式、骨的弹性模量有关。在 4种工况条件下种植体颈部始终是最大应力的部位。种植体上的孔洞是应力集中点之一。提高种植体弹性模量可以降低皮质骨和松质骨的应力。结论 :根据骨形态选择合适直径和长度的种植体有助于提高种植成功率。

摘要：目的构建靶向survivin siRNA真核表达载体,通过RNA干扰技术阻断survivin基因表达。方法针对目的基因survivin序列设计双链DNA(dsDNA),采用DNA重组技术与载体连接,转化感受态细胞经诱导表达筛选阳性克隆子。结果重组质粒经酶切、测序鉴定,证实插入载体目的基因片段大小与插入方向正确,符合其物理图谱。结论靶向survivin siRNA真核表达载体可用于转染肿瘤细胞,阻断survivin基因表达并诱导细胞凋亡的RNAi实验研究,为肿瘤的基因治疗提供一种新的方法。

摘要：目的 针对设计合成构建的BIRC5和Bcl-2小分子干扰RNA（siRNA）的慢病毒质粒表达载体进行有效靶序列筛选,探讨其对靶基因的封闭和抑制作用.方法 将BIRC5和Bcl-2 siRNA慢病毒质粒表达载体通过脂质体介导,分别转染体外培养的Tca-8113细胞.采用半定量RT-PCR检测转染细胞BIRC5和Bcl-2 mRNA表达及Western blot检测蛋白表达水平.结果 BIRC5和Bcl-2 mRNA抑制率分别为35%～76%和30%～72%,所设计的siRNA序列不同程度降低和下调其mRNA及相应的蛋白表达,实验组与对照组比较差异有统计学显著性意义（P〈0.05）,阴性对照组无此作用（P〉0.05）.结论 设计合成的siRNA干扰序列能抑制其靶基因mRNA和蛋白的表达,不同的干扰靶点其抑制效果不同,本实验成功筛选出两对最佳干扰序列作为对肿瘤细胞基因治疗的实验研究.

摘要：目的探索3D打印前牙区牙周骨缺损模型联合案例导向教学法(case-based learning,CBL)在重度牙周病松牙固定术规培教学中的效果。方法纳入口腔全科住院医师规培生60人为研究对象,分为两组,每组30人;其中CBL组接受CBL教学,3D+CBL组采用3D打印前牙区牙周骨缺损模型联合CBL教学。教学结束后,教师对规培生理论和实践成绩进行考核,并设计调查问卷评估规培生松牙固定术学习的教学效果。采用SPSS 16.0软件进行统计学分析,两组间的比较采用t检验。结果相较于CBL组,3D+CBL组理论成绩(89.0±3.2)和实践成绩(90.0±2.5)均高于CBL组理论成绩(83.3±3.6)和实践成绩(84.2±3.5)(P<0.05)。调查问卷结果显示,3D+CBL组规培生在牙周基础知识的掌握、松牙固定术专业知识的掌握、病例诊断及制订治疗计划的能力、临床操作能力、教学内容趣味性、与带教教师沟通意愿、主动接诊患者的意识、规培满意度八个方面均高于CBL组(P<0.05)。结论3D打印前牙区牙周骨缺损模型联合CBL的教学在松牙固定术教学中获得较好的效果,为3D打印模具在前牙松牙固定术临床教学中的应用提供了参考。