摘要：在PCR过程中 ,模板GC含量过高是一个不利因素。如果设计扩增片段较长 ,则进一步增加了PCR扩增的难度。解决这一问题对于以PCR成功获取富含GC的长基因有非常重要的意义。以人巨细胞病毒pp65全基因 (约 1 95 0bp ,GC %为 67%)为例 ,在PCR系统中测试不同添加剂(甘油、乙醇、DMSO、甜菜碱等 )及各种组合 ,摸索扩增目的基因的最佳条件。结果发现 :无或单一的添加剂都不能获得目的基因片段 ,只有当同时使用DMSO和甜菜碱 ,并在适当浓度时才能够获得特异产物。在PCR系统中包含复合增强剂能有助于高GC %、长基因片段的扩增 。

摘要：目的 比较Ⅰ＋Ⅲ型脊髓灰质炎减毒活疫苗（人二倍体细胞）（bOPV）糖丸和液体剂型与Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗（sIPV）联合序贯免疫接种在≥2月龄婴儿中的免疫原性和安全性.方法于2015年9月至2016年6月,采用随机、盲法、单中心、平行对照设计,选择广西柳州市≥2月龄的婴儿为研究对象,将其分为1sIPV＋2bOPV和2sIPV＋1bOPV组,每种序贯免疫程序按bOPV剂型不同再分为糖丸剂型组与液体剂型组,即1sIPV＋2bOPV糖丸组、1sIPV＋2bOPV液体组、2sIPV＋1bOPV糖丸组、2sIPV＋1bOPV液体组,每组100名,按照0、28、56 d的免疫程序,共接种3剂.记录至少接种1剂次受试者（399名）不良反应事件;全程免疫后28 d,采集排除脱落者和违背试验方案者（共350名）血样,采用细胞培养微量中和试验测定抗脊灰病毒Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型中和抗体滴度（GMT）,计算抗体阳转率,并对其进行统计学分析.结果1sIPV＋2bOPV糖丸组、1sIPV＋2bOPV液体组、2sIPV＋1bOPV糖丸组、2sIPV＋1bOPV液体组全部不良反应发生率分别为79%（79/100）、76%（76/100）、80%（79/99）和74%（74/100） （χ2=1.23,P=0.747）;严重不良反应发生率分别为6%（6/100）、5%（5/100）、6%（6/99）和4%（4/100）（χ2=0.57,P=0.903）.全程免疫后,1sIPV＋2bOPV糖丸组、1sIPV＋2bOPV液体组、2sIPV＋1bOPV糖丸组、2sIPV＋1bOPV液体组Ⅰ型脊灰抗体阳转率分别为99%（86/87）、100%（83/83）、99%（87/88）、99%（91/92）（χ2=0.94,P=0.815）,Ⅱ型分别为47%（41/87）、57%（47/83）、80%（70/88）、79%（73/92）（χ2=31.56,P〈0.001）,Ⅲ型分别为100%（87/87）、99%（82/83）、100%（88/88）、99%（91/92）（χ2=2.02,P=0.568）;Ⅰ型脊灰抗体GMT分别为4539.68、6243.43、6819.53、7916.29（F=25.87,P〈0.001）,Ⅱ型分别为12.98、10.54、63.75、84.21（F=8.68,P=0.034）,Ⅲ型分别为1172.55、1416.03、2648.89、3250.75（F=14.50,P=0.002）.结论 相同序贯免疫程序中,bOPV糖丸剂型与液体剂型在≥2月龄的婴儿中均具有良好的安全性和免疫原性;相同剂型不同免疫程序中,2sIPV组较1sIPV组产生更高的血清中和抗体水平,尤其表现在Ⅱ型、Ⅲ型免疫后抗体GMT水平.

摘要：目的评价口服脊髓灰质炎(脊灰)减毒活疫苗(人二倍体细胞)[Oral Poliomyelitis Attenuated Live Vaccine(Human Diploid Cell),OPV(HDC)],在≥2月龄儿童中的安全性和免疫原性。方法采用随机、盲态、对照的原则进行设计,1200名2～5月龄婴儿随机接种OPV(HDC)和对照疫苗,用抗脊灰病毒中和抗体试验检测免疫前、后抗体。结果接种3剂OPV(HDC)后全身反应轻微,全程免疫后1个月,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型中和抗体免疫成功率分别为98.28%、95.32%、95.34%;免疫后易感人群的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型中和抗体几何平均滴度,分别为1∶1243.72、1∶234.38、1∶273.10。结论 OPV(HDC)在≥2月龄儿童中具有良好的安全性和免疫原性。

摘要：目的考核和评价我国自行分离毒株研制的冻干水痘减毒活疫苗的安全性和免疫原性。方法采用随机、双盲、对照的原则进行设计,在2～6岁健康人群中进行开放式临床观察。结果试验疫苗共接种易感儿童738人,接种后的总体中强发热反应率为5.96%(44738),皮疹水痘样皮疹发生率为0.68%(5738);易感者接种39810PFU、2000PFU以及500PFU病毒量的疫苗后,抗体GMT分别为36.4、34.3和18.6;抗体阳转率分别为100%、98.77%和85.42%。结论我国自行研制的水痘疫苗具有较好的安全性和免疫原性。