摘要：海上油气输送大多采用混输方式,段塞流为常见的流型,严重段塞流会对下游的生产设备产生较大的冲击。对墨西哥湾深海油气田开采过程进行数值模拟分析,采用OLGA软件对海底立管底部的段塞流进行动态的数值模拟,观察立管压力、入口压力以及持液率等影响因素,提出调节节流阀开度、调节立管底部注气量的双系统抑制段塞流方案,并根据模拟结果对段塞流捕集器的尺寸进行设计。

摘要：目的利用规律间隔成簇短回文重复序列/相关蛋白9(CRISPR/Cas9)系统构建靶向小鼠CREPT基因的敲除质粒。方法根据CRISPR/Cas9靶点设计原则靶向小鼠CREPT基因的sgRNAs,与体外转录载体pUC57-sgRNA连接,构建CREPT基因敲除质粒;体外切割实验验证设计的sgRNAs是否具有活性。结果设计了3条sgRNAs并分别准确插入pUC57-sgRNA载体;体外切割实验结果显示,以上3条sgRNAs均能够介导Cas9蛋白对靶片断进行切割。结论制备了小鼠CREPT基因敲除质粒和体外转录的sgRNAs,为构建CREPT基因敲除小鼠模型奠定了重要基础。

摘要：[目的]构建靶向小鼠CREPT基因134位丝氨酸的CRISPR/Cas9载体并检测其编辑效率。[方法]利用在线网站设计sgRNAs并克隆入体外转录载体pUC57-sgRNA,桑格测序验证重组载体是否构建成功;以上述重组载体为模板体外转录获得的sgRNAs与商品化Cas9蛋白和靶片段于37℃孵育30 min,随后产物进行琼脂糖凝胶电泳以检测sgRNAs编辑效率。[结果]设计了2条靶向小鼠CREPT基因134位丝氨酸的sgRNAs,并分别准确插入pUC57-sgRNA载体,插入序列无突变;2条sgRNAs均能够与Cas9蛋白正确结合从而介导Cas9蛋白对靶片段的切割,编辑效率分别为0.30、0.36。[结论]成功构建了靶向小鼠CREPT基因134位丝氨酸的CRISPR/Cas9基因编辑载体,且由此转录出的sgRNAs均具有编辑活性,可直接用于小鼠受精卵显微注射制备点突变小鼠模型。