摘要：背景:单份脐血难以满足成人造血干细胞移植的要求,需对其进行体外扩增,这不仅需要较长的时间和较高的培养条件,而且容易导致干细胞自身分化,从而影响移植效果。目的:克隆人白细胞介素3基因cDNA,构建其真核表达载体并转导脐血CD34+细胞,观察白细胞介素3的表达情况。设计、时间及地点:细胞-基因组学体外实验,于2008年在承德医学院完成。材料:健康成人外周血由承德市中心血站提供,脐血由承德市妇幼保健院提供,提供者对实验均知情同意。方法:采集健康成人外周血,应用Ficoll密度梯度法分离单个核细胞,免疫磁珠法分离脐血CD34+细胞。提取白细胞介素3mRNA,应用RT-PCT扩增白细胞介素3cDNA,构建真核表达载体pcDNA3/IL-3。设立2组:实验组利用基因枪技术将pcDNA3/IL-3导入脐血CD34+细胞中,对照组未行转染。主要观察指标:采用人白细胞介素3ELISA试剂盒检测脐血CD34+细胞上清液中白细胞介素3水平。结果:扩增的白细胞介素3基因cDNA理论上应为616bp,实际PCR产物经琼脂糖凝胶电泳后,紫外线下可见预期大小的条带,反转录合成的cDNA完整。BamHⅠ和XbaⅠ双酶切后,电泳可见616bp的插入片段,与白细胞介素3基因序列相同。转染第1～7天,实验组脐血CD34+细胞上清液中白细胞介素3水平明显高于未转染对照组(t=3.46,P<0.05)。结论:白细胞介素3基因cDNA克隆成功,并成功构建了真核表达质粒pcDNA3/IL-3,pcDNA3/IL-3能在脐血CD34+细胞中短期有效表达。

摘要：免疫组织化学在病理工作中应用十分普遍,然而其结果影响因素较多,合理设置适当的对照是质量控制的关键.原有对照方法较繁琐且不经济,因而部分单位在实际工作中不设立阳性对照,对很多缺乏有自身阳性对照的病变,使得免疫组织化学结果的判断缺乏可靠性.国外有人试用过蛋白质多肽作为阳性对照,但因其没有特定的细胞结构也就难以发挥作用.国内有人介绍因阑尾含有多种组织和细胞,可作为多种抗原的对照;或根据需要收集各种的组织切成细丝包埋在一起,然后连续切片备用;或类似于多组织切片用芯片仪将不同组织排列在一起进行连续切片备用[1-2].但这些介绍的方法操作繁琐、备用片难以运送保存、工作量增加较大、对照物体积大、试剂耗费要增加一倍.由于存在以上多种缺陷,使得这些方法在实际工作中无法推广应用.为解决以上问题,我们设计了一种利用已知阳性、阴性标本单细胞组合的悬液,用斑点式或点涂式方法建立一一对照的方法.

摘要：目的采用Box-Behnken效应面法筛选石杉碱甲纳米结构脂质载体最佳处方。方法采用熔融超声-高压匀质法制备石杉碱甲纳米结构脂质载体,分别以混合脂质(X1)、混合乳化剂(X2)和脂药比(X3)为考察对象,以粒径(Y1)、包封率(Y2)和载药量(Y3)为评价指标,利用三因素三水平Box-Behnken效应面设计法筛选石杉碱甲纳米结构脂质载体的最佳处方。结果按最优处方制备的纳米粒粒径为(121.67±3.21)nm、包封率为(89.18±0.28)%、载药量为(1.46±0.05)%,与预测值偏差均小于5%。结论采用Box-Behnken效应面法优化石杉碱甲纳米结构脂质载体处方是有效、可行的。

摘要：文章阐明了德兴矿震监测台网建设的必要性,围绕德兴矿震监测和研究需求,按照合理布局、有效监控的原则,设置了6个流动测点,与区域地震台网4个固定站点形成了德兴矿震监测台网规模,按照实时监测的要求搭建了监测台网技术系统,实现了对德兴矿区的有效监控。由噪声实测值数据计算了监测台网理论监控能力,数据显示监控核心区监控能力在ML1.0级以上。德兴矿震监测台网累积的基础监测数据,将为开展矿震研究奠定坚实基础。

摘要：采用紫外照射法对原始菌株进行诱变和筛选,得到一株高产普鲁兰变异菌株T1,使普鲁兰的转化率达30.14%,是原始菌株的5.7倍.通过正交设计实验对原始菌株与变异株T1的最佳发酵条件进行了比较,确定了变异株T1的最佳发酵条件为:蛋白胨0.5g/L,蔗糖50g/L,起始pH5.0.普鲁兰的转化率主要与氮源浓度有关.并对该变异株与原始菌株的发酵特征进行了研究,发现变异株的特征发生了根本性改变.

摘要：目的：探讨成人错合矫治特点，总结矫治经验。方法：对45例成人错合患者采用固定矫治器，利用直丝弓矫治技术，部分配合活动矫治等辅助装置，疗程6～30个月。结果：患者均不同程度达到求治目的，86．7％患者对结果感到满意，无失败病例。结论：成人错合畸形诊断设计时应根据患者自身牙合特点开结合患者要求，治疗中注意细丝轻力的应用，矫治结束应长期保持，才能达到较好的矫治效果。

摘要：文章提出了轨道交通工程质量监管的评价方法。基于系统工程、管理学等理论建立了轨道交通工程监管的指标要素,提出了如何对建设七方责任主体进行监管;采用定量分析方法设计出通过对各责任主体的评价,来反映质量监管情况,并对质量监管的方式和监管的重点提供科学的依据。

摘要：目的采用Box-Behnken效应面法优化贝伐单抗介导的阿霉素白蛋白纳米粒制备工艺。方法在采用去溶剂化-固化交联法制备出的阿霉素白蛋白纳米粒的基础上,用异型双功能交联剂NHS-PEG3500-MAL作为偶联剂,将贝伐单抗偶联到载药白蛋白纳米粒表面。以2-亚氨基硫烷盐酸盐用量、载药白蛋白纳米粒与贝伐单抗质量比、NHS-PEG3500-MAL用量为影响因素,以纳米粒粒径、载药量和包封率作为评价指标,用三因素三水平的Box-Be-hnken效应面法设计试验,并对免疫纳米粒的制备进行优化;考察制备出的免疫纳米粒的抗体活性保存率及稳定性。结果优化后的处方是2-亚氨基硫烷盐酸盐50μg、DOX-A-NPs与Bevacizumab质量比为27.5 ***-1、NHS-PEG3500-MAL用量为8.8 mg,以此处方制得的免疫纳米粒粒径为(216.1±2.31)nm、载药量为(28.93±0.94)%、包封率为(80.39±2.83)%,测得值与预测值相差较小。结论采用Box-Behnken效应面法优化并制备阿霉素白蛋白免疫纳米粒是可行的。