摘要：生长素极性运输输出载体OsPIN1基因家族可能参与调控水稻根负向光性,其中OsPIN1a和OsPIN1b参与水稻根负向光性已得到证实。为了研究OsPIN1d基因与水稻根负向光性形成的关系,依据GenBank数据库中OsPIN1d(Accession number:BR000830)的核苷酸序列,设计特异性引物,通过RT-PCR从水稻根尖的cDNA中扩增出完整的OsPIN1d基因全长。生物信息学分析表明,OsPIN1d的序列全长为1 497bp,编码554个氨基酸,GC含量为64.08%;氨基酸序列多重比对及系统发育树构建表明,OsPIN1d与水稻OsPIN1b、玉米OsPIN4以及拟南芥AtPIN2、OsPIN1c、OsPIN1a和AtPIN1等基因的遗传距离较近。通过构建融合超表达载体pCAMBIA-1301-OsPIN1d∷GFP,转化并获得其转基因水稻,经RT-PCR检测和GUS染色结果显示,外源片段已成功整合到水稻基因组内,并在根部高效表达;受单侧光照射后,转基因水稻种子的根负向光性明显大于野生型,且向光侧OsPIN1d-GFP荧光密度明显弱于背光侧。研究表明,OsPIN1d参与了水稻根负向光性的IAA和NAA的运输,从而促进了根负向光性的形成。

摘要：为了探讨水稻生长素输出载体蛋白OsPIN1a与根负向光性的关系,根据GenBank数据库报道的OsPIN1a核苷酸序列,利用RT-PCR技术,设计特异引物从水稻cDNA中扩增得到生长素输出蛋白基因(OsPIN1a)。测序结果表明,OsPIN1a基因序列中GC含量达65.49%。构建该基因的GFP融合表达载体pCAMBIA-1301-OsPIN1a::GFP,对洋葱表皮细胞的瞬时表达分析表明,融合蛋白主要分布在细胞膜和细胞核内。以农杆菌介导法转化水稻中花11,PCR和GUS染色检测结果表明,目的基因片段已经整合到水稻基因组内;在单侧光照射下,转基因水稻种子根的负向光弯曲角度比野生型大约14.0%,转基因植株中OsPIN1a的表达水平也显著高于野生型植株,说明OsPIN1a可能在水稻根的负向光性反应中起重要作用。

摘要：水稻生长素输出载体OsPIN1a可能参与调控水稻根负向光性反应。为了进一步研究其他OsPIN基因与水稻根负向光性的关系,以GenBank数据库报道的OsPIN1b核苷酸序列为基础,设计特异引物以RTPCR从水稻cDNA中扩增得到OsPIN1b基因。测序结果表明获得完整的OsPIN1b基因ORF序列;生物信息学分析表明,OsPIN1b基因序列全长1 665 bp,与已报道的序列相吻合,其GC含量为64.08%,编码554个氨基酸。进一步构建了该基因的GFP融合表达载体pCAMBIA-1301-OsPIN1b∷GFP并转化水稻中花11,分子检测和GUS染色表明外源片段已经成功整合到水稻基因组,为研究OsPIN1b在水稻根负向光性中的作用奠定基础。

摘要：以番荔枝叶片为原料,在单因素试验基础上,以提取时间、提取温度、液料比为自变量,进行3个因素三水平Box-Behnken试验设计,利用响应面分析法优化番荔枝叶片花色素苷提取条件,并测定番荔枝叶片花色素苷对羟自由基、超氧阴离子和DPPH的清除能力,研究了其抗氧化性。结果表明,提取时间4.5h,提取温度60℃,液料比为5∶1时,平均吸光度值2.081,为最优值;不同浓度花色素苷提取液对羟自由基、超氧阴离子以及DPPH有较强的清除作用,并与浓度呈一定的正相关关系。

摘要：本研究以抗镰刀菌枯萎病香蕉种质"金手指"(AAAB)为材料,根据已克隆的抗枯萎病基因的 NBS保守结构域设计简并引物,通过同源序列克隆获得了 20 条来自基因组 DNA 的 RGA 片段,大小为 530 bp 左右。根据其推断的氨基酸序列,经保守结构域分析,其结构域均为 NB-ARC,属于 non-TIR-NBS 类候选抗病基因类序列。它们均具有 P-loop (GMGGVGKTT),Kinase-2 (LLVLDDIW),RNBS-B (CKVLFTTRS)以及疏水氨基酸结构域 GLPL (GLPLALKVL)等 4 个保守氨基酸基元。20 个 RGA 之间核苷酸序列的相似性在 41.1%～99.3%之间,氨基酸序列的相似性在 33.2%～96.3%之间。同时,对分离得到的 20 条 RGAs 进行系统发育树分析,发现它们分布在 5 个不同的区域。并且所编码的氨基酸序列与已知抗枯萎病基因 Fom-2、I2C-1、I2C-2和 I2 等编码的氨基酸序列表现出 28%～54%的同源性,证明了抗病基因在进化上具有一定的保守性。因此,这些抗病基因同源片段(RGA)的分离将为进一步从香蕉中分离抗枯萎病基因打下基础,也可作为分子标记筛选香蕉抗枯萎病的候选基因。