摘要：目的 建立一种准确、快速的检测胸腺输出功能的方法。方法 根据TCRδ基因序列，设计引物和探针，建立实时荧光定量PCR检测T细胞受体重排切除环（TRECs）的方法；并用于检测正常人及慢乙肝PBMCs中TRECs的含量。结果 建立了测定TRECs含量的实时荧光定量PCR方法，产物与预计长度相符，序列正确；最低可扩增出5 copies的模板；重复五次，Ct值的变异系数为1．06％。正常人21-45岁组的TRECs含量为（7767．4±2369．5）copies／10^6 PBMCs，16-20岁组为（28374．4±7820．4）copies／10^6 PBMCs，21-45岁慢乙肝组（6480．9±2031．2）copies／10^6 PBMCs，正常人21-45岁组分别与16-20岁组、同龄慢乙肝组比较差异均有统计学意义，P〈0．05。结论 实时荧光定量PCR检测TRECs的方法特异性强，灵敏度高，重复性好。正常人21-45岁组的胸腺输出功能低于16-21岁组，慢乙肝组低于同龄正常人。

摘要：目的构建荧光定量PCR检测T细胞受体重排切除环（TRECs）的标准品质粒和标准曲线。方法对TCRδ基因进行序列分析，设计一对引物和探针。提取正常人外周血单个核细胞中的DNA，经普通PCR扩增，产物纯化后与pUCM-T载体连接并转化入大肠杆菌DH5α，筛选得到重组成功的质粒。结果重组质粒测序后显示目的片段序列正确，表明TRECs基因片段成功克隆。以10^3～10^7copies／ml不同稀释水平的标准品进行荧光定量PCR扩增后，统计学分析显示标准品浓度的对数与Ct值之间存在良好的线性关系（r=-0．998，P＜0．01）。结论所构建的TRECs标准品特异性和线性关系较好。