摘要：目的 建立一种液相芯片检测方法,用于检测新冠病毒和流感病毒。方法 从NCBI数据库分别下载新冠病毒、甲型流感病毒、乙型流感病毒全基因组序列,在保守区域分别设计扩增引物和检测探针,以各病毒标准品质粒为模板,建立多重PCR扩增体系;将核酸探针偶联至荧光编码微球,建立液相芯片检测体系,并对方法进行评价。结果 基于多重PCR和液相芯片技术建立的新冠病毒和流感病毒的检测方法能够同时检测新冠病毒N基因、ORF1ab基因和S基因,甲型流感病毒M基因和乙型流感病毒NS基因及人类看家基因ACTB基因。检测新冠病毒N基因、ORF1ab基因、S基因的灵敏度为1×10^(4)拷贝/反应,甲型流感病毒M基因、乙型流感病毒NS基因的灵敏度为1×10^(3)拷贝/反应;可准确检测新冠病毒N基因、ORF1ab基因和S基因,甲型流感病毒M基因和乙型流感病毒NS基因及人类看家基因ACTB基因片段,没有出现相互干扰的现象。结论 建立的方法能同时检测新冠病毒、甲型流感病毒和乙型流感病毒,可作为新冠病毒及流感病毒感染的诊断及流行病学调查的方法。

摘要：目的建立检测多种蚊媒病毒的液相芯片方法。方法从NCBI数据库分别下载乙脑病毒(JEV)、登革病毒(DENV)、基孔肯雅病毒(CHIKV)、寨卡病毒(ZIKV)、黄热病毒(YFV)、裂谷热病毒(RVFV)基因组序列,比对分析后,在各病毒保守区域分别设计扩增引物和检测探针,以标准品质粒为模板,建立多重PCR扩增体系;将核酸探针偶联至荧光编码微球,建立液相芯片检测方法,并对方法进行评价。结果基于多重PCR和液相芯片技术的常见蚊媒病毒的检测方法能同时对其中任意1种、2种、3种、4种、5种和6种病毒进行检测,具有良好的灵敏性,JEV、DENV、CHIKV、RVFV的灵敏度为1×104拷贝/反应;ZIKV、YFV的灵敏度为1×105拷贝/反应。结论建立的方法能同时快速检测6种常见蚊媒病毒,为蚊媒传染病的预警和控制提供参考。