摘要：目的:筛选对于TX小鼠肾脏起保护作用的效应中药方剂肝豆汤。方法:按照均匀设计法6因素11水平制备实验中药;采用原子吸收法、Western blot法检测不同药物组方对TX小鼠肾脏组织微量元素铜(Gu)、铁(Fe)、锌(Zn)及组织蛋白B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associatedX protein,Bax)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Cysteinyl aspartate-specific proproteases-3,Caspase-3)表达的影响,运用SPSS 17.0软件进行多元回归分析并筛选对TX小鼠肾脏起保护作用的效应中药。结果:本实验筛选出肝豆汤中与肾组织Cu、Zn含量密切相关的效应中药有X_6(三七,应取最大值0.009 g入方,P=0.030),X_2(姜黄,应取最大值0.059 g入方,P=0.003);本实验未筛选出肝豆汤组方中与TX小鼠肾组织Fe含量相关的效应中药;肝豆汤中与TX小鼠肾组织凋亡蛋白Bcl-2、Bax、Caspase-3表达密切相关的效应中药有X3(黄连,应取最大值0.059 g入方,P=0.008)、X4(泽泻,应取最大值0.072g入方,P=0.014)、X5(金钱草,应取最大值0.072 g入方,P=0.008)、X_6(三七,应取最大值0.009 g入方,P=0.014)。结论:肝豆汤肾保护效应中药最佳配伍及剂量配比为:黄连0.059 g、姜黄0.059 g、金钱草0.072 g、泽泻0.072 g、三七0.009 g,大黄未进入上述指标回归方程。中药肝豆汤中黄连、姜黄、金钱草、泽泻、三七通过调节微量元素铜锌代谢及调控凋亡蛋白多靶点发挥对TX小鼠肾脏的保护作用,大黄对于TX小鼠的肾脏保护作用尚有待证实。

摘要：目的基于均匀设计法筛选中药复方肝豆汤保护TX小鼠神经细胞的效应中药。方法基于"6因子11水平表"均匀设计法,以神经细胞内Bcl-2、Bax蛋白表达水平及血清和脑组织中铜含量为指标,以TX小鼠为Wilson病动物模型,采用多元逐步回归分析法优选肝豆汤中6种药物(大黄、姜黄、黄连、泽泻、金钱草、三七)的效应中药配伍。采用Western blot法以及等离子质谱法分别测定细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax和血清、脑组织铜含量。结果与对照组比较,TX小鼠脑组织中Bcl-2表达水平显著降低(P<0.05),Bax蛋白表达水平显著升高(P<0.05),脑组织铜含量显著升高(P<0.05),血清铜含量显著降低(P<0.05)。多元逐步回归分析结果显示,姜黄和大黄分别进入血清铜含量及脑组织铜含量的回归方程,黄连和泽泻均进入脑组织Bcl-2和Bax表达水平的回归方程,姜黄和金钱草分别进入神经细胞Bcl-2/Bax的回归方程,三七均未进入上述指标的回归方程。结论肝豆汤中大黄、姜黄、黄连、泽泻、金钱草配伍组合,可通过多靶点保护TX小鼠神经细胞;三七在保护TX小鼠神经细胞过程中未发挥明显效应。