摘要：目的建立黄芪休眠芽茎尖玻璃化超低温保存技术体系。方法采用单因子实验设计,研究PVS2处理时间、休眠芽大小、冻存茎尖大小以及缺少装载和PVS2处理对黄芪休眠芽玻璃化超低保存成活率的影响。结果将一年生黄芪种苗覆土后置于4℃低温锻炼20d左右,切取完整的休眠芽,剥至1~2 mm长的茎尖,先用含2 mol/L甘油+0.4 mol/L蔗糖的MS溶液装载20 min,再用PVS2处理50 min后投氮,恢复培养时从液氮中取出,38℃水浴化冻2 min,用无菌滤纸吸干表面溶液后接种到恢复培养基中(MS+2.0 mg/L BA+0.5 mg/L IAA+3%蔗糖+0.7%琼脂,pH5.8),先暗培养一周,再移到正常光照下进行培养,休眠芽冻存后的成活率高达100%。结论建立了高效的黄芪休眠芽玻璃化超低温保存技术体系,为药用植物的种质资源保存开辟了一条新的途径。

摘要：目的:建立甘肃贝母组织培养小鳞茎的直接发生技术体系。方法:采用单因子试验设计,筛选适宜甘肃贝母组织培养的外植体及灭菌方法,探究外植体种类、茎段大小、培养温度、激素组合、培养方式等对小鳞茎诱导和增殖的影响。结果:休眠芽的最佳灭菌方式为75%乙醇灭菌30 s,0.1%升汞灭菌1 min,无菌水冲洗3~5次。休眠芽为外植体时培养效果最好,其次为茎段和小鳞叶,叶片效果较差。茎段大小对甘肃贝母组培小鳞茎诱导影响不大。固体培养基更适宜直接诱导小鳞茎,培养基配方为:1/2 MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L或1/2 MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 1.0 mg/L,蔗糖3%、琼脂0.7%,pH 5.8。一定的变温培养有利于其鳞茎增殖。适宜的生根培养基为1/2 MS+NAA 0.1 mg/L+IAA 0.5 mg/L+1.5%蔗糖+0.7%琼脂,pH 5.8。结论:建立了甘肃贝母离体培养小鳞茎直接发生技术体系,可为甘肃贝母种质保存及工厂化育苗提供技术支撑。