摘要：利用人H1 RNA启动子、EGFP基因及Neomycin抗性基因,构建用于禽类细胞基因持续沉默和快速筛选的实用型RNAi载体。在将pCDNA3.1(+)载体上的SV40启动子替换为鸡源的β-actin启动子后,装入EGFP基因表达框以及用于驱动外源shRNA转录的人H1 RNA启动子,构建成同时具有EGFP和Neomycin抗性双标记的RNAi载体,并为载体引入独特设计的含媒介序列的多克隆位点以方便外源shRNA编码小片断插入后的快速筛选,载体设计非常实用。插入靶向EGFP和sIgMλ基因的shRNA编码序列后分别瞬时转染DF-1和DT40细胞,结果显示靶基因表达得到了明显抑制。联用EGFP和Neomycin双标记快速筛选sIgMλ轻链基因稳定沉默的DT40细胞克隆的结果也证实,H1启动子转录shRNA的干扰效果是高效的,双标记筛选策略不仅有效而且方便、快捷。

摘要：为建立猪IFN-β及IRF-3基因实时荧光定量PCR检测方法,依据GenBank中IFN-β和IRF-3基因的保守序列,设计并合成各自特异性引物,并以β-actin为内参基因,采用SYBR Green-Ⅰ为染料,建立实时荧光定量检测方法。提取猪肺泡巨噬细胞总RNA,经反转录得cDNA,用特异性引物经PCR扩增得到IFN-β和IRF-3基因,将其克隆至pMD-19T载体,经测序鉴定后得重组质粒,依次10倍稀释做为标准品,建立标准曲线及溶解曲线。结果表明,β-actin基因、IFN-β基因和IRF-3基因标准曲线线性关系较好,R2≥0.997;溶解曲线为特异性单峰,无非特异性扩增,检测下限可达100个拷贝/μL。建立的猪IFN-β和IRF-3基因实时荧光定量RT-PCR检测方法,特异性强、重复性好,为从分子水平上研究猪的免疫应答奠定了基础。

摘要：围绕叶尔羌河流域喀什地区水光可再生能源发电互补特性分析与量化问题,基于Pearson、Spearman秩、Tau-b相关系数,提出一种互补系数计算方法,研究该地区莎车、英吉沙、叶城网架节点的水光出力互补规律。以优先消纳光伏出力前提下的源-荷匹配系数最小为目标,建立水光互补联合调度模型,对水电出力过程进行优化调整。结果表明:在小时尺度上,3个相关系数值范围为-0.849~-0.407,英吉沙、莎车节点的水光互补系数分别为0.715、0.501,表明水光出力具有一定的互补性;在日尺度和月尺度上,各节点的水光互补性相对较弱。通过水光互补模型优化后,水光出力的互补性提高,在小时尺度、日尺度、月尺度上,水光互补系数分别提高至0.750、0.755、0.621,相对于原互补系数分别提高了37.6%、221.3%、37.4%。