摘要：目的探讨MHCⅡ类分子转录激活因子(CⅡTA)锤头状核酶抑制细胞表面MHCⅡ类分子的表达。方法设计并克隆针对CⅡTA第464位点的锤头状核酶(Rz464)及其相应的CⅡTA靶基因,分别插入pGEM-T载体,进行细胞外切割活性鉴定,进一步将Rz464亚克隆入真核表达载体pIRES2-EGFP(pIRES2-EGFP-Rz464,pRz464),并稳定转染Raji细胞株,流式细胞术检测经典的MHCⅡ(HLA-DR-、DP-、DQ)类抗原表达,RT-PCR分析CⅡTA mRNA水平。结果细胞外活性鉴定表明,Rz464具有明显的切割活性。细胞内切割实验显示:pRz464阳性Raji细胞表面HLA-DR、DP、DQ抗原表达分别降低了75.93%、64.14%、78.32%;同时CⅡTA的mRNA含量降低(P<0.05)。结论抗CⅡTA锤头状核酶Rz464可有效抑制MHCⅡ类抗原的表达。

摘要：采用正交实验设计L9(34),以MS培养基,分别加入不同质量浓度的6-BA、NAA、ZT和蔗糖进行辣木丛生芽增殖诱导;采用正交实验设计L9(34),以不同基本培养基,不同质量浓度的IBA、NAA进行辣木组培苗不定根诱导。结果表明,MS+蔗糖30 g/L+6-BA 1 mg/L+NAA 0.2 mg/L+琼脂7 g/L为辣木诱导丛生芽较佳的启动培养基,丛生芽诱导率可达100%;MS+蔗糖30g/L+ZT 0.5 mg/L+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L+琼脂7 g/L,为辣木丛生芽增殖较佳的培养基,增殖系数为6.17;1/2MS+IBA 0.2 mg/L+NAA0.1 mg/L,为辣木丛生芽生根较佳的培养基,不定根诱导率可达100%。