摘要：目的构建lncRNA LINK-A的特异性RNAi慢病毒载体,并借此敲减人U251胶质瘤细胞株内的LINK-A,探究LINK-A对U251胶质瘤细胞增殖的影响。方法针对人LINK-A设计siRNA序列,构建RNAi慢病毒载体质粒并进行测序鉴定;利用pHelper 1.0、pHelper 2.0以及shRNAi 3种质粒分别转染293T细胞,筛选分离慢病毒并测定滴度;用PBS及构建好的慢病毒感染人U251胶质瘤细胞,实验分3组:空白组(PBS)、NC组(空载病毒)、LINK-A(-)组(LINK-A RNAi慢病毒),72 h后利用RT-PCR检测细胞中LINK-A的表达情况;取病毒感染成功后的U251胶质瘤细胞行平板克隆实验培养10 d,行CCK-8实验分别于24 h、48 h检测。结果RNAi慢病毒载体质粒测序结果与RNAi设计序列一致,提示LINK-A RNAi慢病毒载体构建成功,滴度为3×108 TU/mL;病毒感染U251胶质瘤细胞72h后,细胞生长状态良好,荧光持续稳定表达,LINK-A RNA相对表达量明显降低(P<0.05),表明病毒成功感染U251细胞;10 d后LINK-A(-)组细胞克隆形成数及形成率较空白组及NC组明显减少(P<0.05);与空白组及NC组相比,24 h后LINK-A(-)组OD值减少(P<0.05),72 h明显减少(P<0.05)。结论人LINK-A RNAi慢病毒构建成功;LINK-A表达降低可抑制U251胶质瘤细胞增殖。

摘要：目前城市植被分类受特征相近、光谱相似影响导致植被漏分、错分。因此,设计了一种多尺度特征感知网络(MFDN)结合高分辨率无人机可见光影像对城市植被分类。该网络针对漏分、错分问题,通过在输入层引入坐标卷积减少空间信息的丢失;构建并行网络增强多尺度特征信息并在网络之间引入重复多尺度融合模块使整个过程保持高分辨率表示,减少细节特征的丢失;同时添加分离特征模块扩大感受野,获取多尺度特征,从而有效缓解了城市植被错分、漏分现象。结果表明,MFDN方法在仅使用无人机可见光影像条件下主要是通过空间模式而不是光谱信息促进了城市植被分类,平均总体精度为89.54%,平均F1得分为75.85%,平均IOU为65.45%,分割结果准确完整。因此,所提方法与易于操作的低成本无人机系统相匹配,适用于城市植被快速调查,可以为城市空间利用和生态资源调查提供技术支持和科学依据。