摘要：根据结核分枝杆菌23SrRNA基因序列和牛分枝杆菌特殊基因序列,设计了2对针对结核分枝杆菌和牛分枝杆菌的特异性引物和2条用不同荧光基团标记的TaqMan探针,建立了结核分枝杆菌和牛分枝杆菌的二重实时荧光定量PCR检测方法,并对建立的方法进行敏感性、特异性测定和临床样品检验。结果显示,该方法特异性好,能区分不同模板浓度组合的结核分枝杆菌和牛分枝杆菌;可检测到10copies模板的结核分枝杆菌和牛分枝杆菌;对保存的50份PPD检测阳性牛的鼻黏液、牛乳和淋巴结进行检测,结果6份结核分枝杆菌阳性,1份牛分枝杆菌阳性,其余均为阴性,与PCR的检测结果一致。由此可见,建立的二重实时荧光定量PCR方法具有特异、敏感、快速、可定量检测等优点,适合用于结核分枝杆菌和牛分枝杆菌的鉴别检测。

摘要：根据已发表的结核分枝杆菌23S rRNA和牛分枝杆菌特殊基因序列,设计并合成了2对可扩增结核分枝杆菌和牛分枝杆菌特异性基因片段的引物,建立二重PCR快速检测结核分枝杆菌和牛分枝杆菌的方法,并研制出检测试剂盒。结果表明,该检测试剂盒对结核分枝杆菌能特异性地扩增出838 bp条带而扩增不出631 bp条带,牛分枝杆菌能特异地扩增出838 bp和631 bp条带,而对其他牛菌株的DNA扩增结果均为阴性;敏感性试验表明最低能检测出50 pg的结核分枝杆菌和牛分枝杆菌DNA模板;保存期测定结果表明,在-20℃条件下保存至1、3、6、9个月时,试剂盒的敏感性无明显变化,仍能检测到50 pg的DNA模板,保存至12个月时其敏感度仍能100%检出阳性样品。

摘要：目的 探索广西壮族自治区HIV与MTB双重感染患者的临床特征,为进一步研究双重感染的控制、诊疗提供科学依据.方法 连续纳入2013年9月至2015年8月广西壮族自治区南宁市、来宾市和贵港市可随访的HIV感染者或AIDS患者,且发现HIV感染后无结核病诊断史及抗结核药物使用史;同时纳入性别、年龄（±3岁）相近的单纯结核病患者,均采用统一设计的调查表调查.通过临床特征分析及相关实验室检查对双重感染患者、单纯HIV感染者或AIDS患者、单纯结核病患者进行比较分析.结果 共纳入HIV感染者或AIDS患者1024例,确诊或临床诊断并发MTB感染者160例（15.62％）（简称“双重感染组”）;单纯HIV感染者或AIDS患者505例（49.32％）.纳入单纯结核病患者489例.双重感染组在咳嗽咯痰[76.88％（123/160）]、符合结核病的胸部影像学改变[80.00％（128/160）]、痰涂片阳性率[7.32％（9/123）]均低于单纯结核病组[93.46％（457/489）、98.98％（484/489）、34.97％（171/489）]（χ^2分别为34.88,80.76,36.20,P值均＜0.01）,而低热[41.25％（66/160）]、体质量下降[34.38％（55/160）]、盗汗[8.75％（14/160）]、肺外结核[22.50％（36/160）]的发生率均高于单纯结核病组[8.79％（43/489）、6.34％（31/489）、3.89％（19/489）、0.41％ （2/489）]（χ^2=90.88,P＜0.01;χ^2=82.43,P＜0.01;χ^2=5.91,P=0.015;χ^2=106.73,P＜0.01）.双重感染组患者体质量下降[34.38％（55/160）]、气促和（或）呼吸困难[21.88％（35/160）]、胸痛[10.00％（16/160）]、腹泻数天不止[9.38％（15/160）]、舌表面鹅口疮或口腔黏膜奶酪样白斑[27.50％（44/160）]等临床表现发生率均高于单纯HIV感染者或AIDS患者[6.14％（31/505）、3.17％（16/505）、0.59％（3/505）、2.18％（11/505）、5.35％（27/505）]（χ^2分别为86.04,60.05,Fisher精确检验,16.75,62.53,P值均＜0.01）.CD4＋T淋巴细胞计数（74.00个/mm3）明显低于单纯HIV感染者和（或）AIDS患者（282.00个/mm3）（Z=-9.43,P＜0.01）.双重感染组未接受艾滋病抗病毒药物治疗（HAART）者咳嗽咯痰[81.36％（96/118）]、低热[50.00％（59/118）]、体质量减轻[41.53％（49/118）]的发生率明显高于接受治疗者[64.29％（27/42）、16.67％（7/42）、9.52％ （4/42）]（χ^2=5.08,P=0.024;χ^2=14.20,P＜0.01;χ^2=14.32,P＜0.01）;而有无卡介苗接种史[62.86％（22/35）、84.80％（106/125）]的差异仅在与结核病相符的影像学改变方面有统计学意义（χ^2 =8.23,P＜0.01）.结论 双重感染患者临床特征复杂,诊断难度大,需对其加强监测和随访,并探索和推广新快速诊断方法,以及早发现、进行治疗.