摘要：目的 沙眼衣原体主要外膜蛋白(major outer membrane protein,MOMP)在维持沙眼衣原体结构稳定性和衣原体感染宿主细胞过程中发挥重要作用,为深入研究MOMP蛋白的功能及作用机制,使用人工合成多肽制备MOMP多克隆抗体。方法 分析沙眼衣原体MOMP的抗原表位,根据15个沙眼衣原体血清型MOMP保守肽段,设计并合成MOMP特异性肽段,与血蓝蛋白偶联后免疫新西兰兔。采用免疫亲和层析纯化免疫血清,应用SDS-PAGE和ELISA评估血清抗体纯度及效价,利用Western blot和免疫荧光染色鉴定MOMP抗体特异性。结果 纯化后的血清IgG抗体纯度为89.6%,MOMP抗体效价达1∶12 800,Western blot结果显示抗体与8个血清型沙眼衣原体蛋白在40 kDa处特异性结合,免疫荧光染色证实该抗体可特异性结合沙眼衣原体。此外,MOMP抗体与进口商品化抗体明显共定位于宿主细胞内,且两种抗体荧光强度相当。结论 本研究成功制备效价高、特异性好的沙眼衣原体MOMP的兔多克隆抗体,为后续深入研究MOMP的生物学功能提供了有力工具。

摘要：目的：明确单管巢式实时 PCR 检测麻风杆菌的特异性、灵敏性和重复性。方法：以麻风杆菌 hsp18基因为靶基因设计引物和探针，建立单管巢式实时 PCR 方法检测麻风杆菌并与抗酸染色及普通 PCR 进行特异性和灵敏性的比较。结果：单管巢式实时 PCR 检测下限为2.1 fg 质粒 DNA，普通PCR 为21 fg 质粒 DNA，敏感性高10倍；与8种非麻风杆菌无交叉反应；批内相对标准偏差（RSD）为0.24％~1.08％，批间 RSD 为0.09％~2.8％。对比检测54例麻风疑似标本中，抗酸染色、普通 PCR 和单管巢式实时 PCR 的敏感性分别为81.3％（26/32）、87.5％（28/32）和96.9％（31/32）。结论：单管巢式实时 PCR 特异性强、敏感性高且重复性好。

摘要：目的:建立一种能同时快速检测奈瑟淋球菌、沙眼衣原体、生殖支原体、单纯疱疹病毒1型和2型的杂交检测方法。方法:选取靶基因16S rRNA基因和gD糖蛋白基因,设计2对通用引物和特异性探针,建立双重PCR结合反向斑点杂交技术检测以上4种病原体,并对其检测能力进行评估。结果:建立的杂交检测方法检测奈瑟淋球菌、沙眼衣原体、生殖支原体、单纯疱疹病毒1型和2型的敏感性分别为1 CFU、3 IFU、6.7 pg/μL、1 CFU、1 CFU;各特异性探针只与相应病原体扩增产物杂交,未见交叉反应;与临床常规检测方法比较,一致率达96.8%,并显示能检出沙眼衣原体和生殖支原体双重感染。结论:该方法敏感性高、特异性好,并能同时检测多种病原体,在性病的快速诊断和病因学筛查等方面具有重要意义。