摘要：史料情境问题设计是教师在教学设计时有目的地运用典型的、有价值的、有说服力的史料设计问题,引导学生分析史料,探究解决问题。问题设计与深度学习紧密联系,问题的深浅关系思维的深浅。“五何”问题设计法可以有效设计不同层次的思维问题,有助于学生深度学习。所谓“五何”,指“由何”“是何”“为何”“如何”“若何”五项问题[1],体现思维由浅到深,逐级递进的过程,对学生思维的要求越来越高,有利于提升其高阶思维。深度学习是在积极有效的教学引导下,学生积极主动地开展批判性学习.

摘要：为了研究国内分离的首株E种肠道病毒HY12毒株的非结构蛋白3C的功能,本研究以设计合成非结构蛋白3C的特异性引物,PCR扩增出3C的基因片段,并将其克隆到原核表达载体pGEX-4T-1中,构建重组表达质粒。将构建的阳性质粒转化到大肠杆菌菌株BL21中,以IPTG诱导表达3C重组蛋白及应用尿素纯化包涵体的方法纯化重组蛋白。以纯化的3C蛋白作为免疫原免疫6周龄健康的BALB/c小鼠,经3次免疫后,采集其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,经过筛选和亚克隆等过程获得能够稳定表达3C单克隆抗体的阳性杂交瘤细胞株。应用鼠单克隆亚型鉴定试剂盒鉴定出该杂交瘤细胞株所分泌的抗体类型为IgM。以过氧化物酶单层细胞试验(IPMA)和间接ELISA试验鉴定该单克隆抗体的反应原性和特异性,结果表明本试验获得了HY12非结构蛋白3C的单克隆抗体能够特异性检测出牛肠道病毒抗原,为进一步研究E种肠道病毒非结构蛋白3C的功能奠定了基础。

摘要：羊肠道病毒(caprine enterovirus,CEV)感染为国内外新发疫病,其诊断方法尚缺乏研究。本研究依据CEV-JL14毒株的基因组序列,设计合成了1对特异性引物,建立了检测CEV的RT-PCR方法,并对其特异性、敏感性和重复性进行测定,同时应用该方法对疑似CEV感染的临床样品进行检测。结果显示,建立的检测CEV感染的RT-PCR方法具有特异性好、敏感性高、快速和简便等特点,最低检出限为1.13×10^(3)copies/μL。以建立的RT-PCR方法对通过ELISA方法确定的6份阳性样品和22份阴性样品进行检测,结果显示两者的符合率为100%。本研究建立的RT-PCR方法可用于CEV感染的诊断和流行病学调查。