摘要：根据场地周边情况及基坑深度,某工程基坑支护拟采用分级放坡结合内外降水井幕系统。文章根据JGJ 120—99《建筑基坑支护技术规程》中对潜水型非完整井的基坑涌水量计算公式进行计算,确定了降水井数并进行了分布设计,同时对天然分级放坡开挖的剖面进行了设计。

摘要：开发利用可再生能源既可以有效缓解能源需求压力,又可以保护环境,实现科学发展。2006年《中共中央国务院关于推进社会主义新农村建设的若干意见》明确指出：＂要加快农村能源建设步伐,在适宜地区积极推广沼气、秸秆气化等清洁能源技术＂。目前成熟的国产沼气发电机组的功率规格,主要集中在24～600kW这个区段。

摘要：目的研究含人连接蛋白Connexin26(Cx26)基因的真核表达载体构建及其在非洲猴肾细胞(COS-7)中获得稳定、高效表达的方法。方法提取人外周血淋巴细胞RNA,经逆转录制备成cDNA,设计特异性引物,用PCR方法从cDNA中扩增Cx26基因,将其定向插入真核表达载体pCI-neo中获得pCI-Cx26重组子,采用酶切法和测序法鉴定。用脂质体将pCI-Cx26转染COS-7细胞,经G418筛选,获得阳性克隆。用RT-PCR和SDS-PAGE检测对表达产物进行检测。结果从人外周血RNA制备而成的cDNA中可扩增出预期大小的Cx26基因片段,pCI-Cx26经双酶切测序证实构建成功。RT-PCR和SDS-PAGE检测到pCI-Cx26在COS-7细胞中获得稳定、高效表达。结论本研究成功构建了人连接蛋白Cx26基因重组真核表达载体pCI-Cx26;pCI-Cx26脂质体转染COS-7细胞,可见Cx26基因在COS-7细胞中获得稳定、高效的表达。该结果为今后进行pCI-Cx26基因治疗Cx26基因突变引起的遗传性耳聋的研究奠定了实验基础。