摘要：越来越多的癌症患者希望知道病情真相并参与治疗方案的选择,但由于与癌症患者的沟通有着一定的特殊性,对医生的沟通能力提出巨大的挑战。目前医学院校普遍缺乏专门与癌症患者沟通技巧的培训项目。"oncotalk"教学模式是由华盛顿大学等多所美国知名大学共同构建的一种新的教学模式,旨在培养医生与癌症患者的沟通技巧。基于"oncotalk"模式的核心教学理念,并结合我国临床教学实际,设计针对临床实习医生的"oncotalk"教学模式。

摘要：目的体外合成针对人环氧化酶-2(hCOX-2)的小分子干扰RNA(siRNA),并转染入人滑膜成纤维细胞,通过比较不同siRNA抑制COX-2 mRNA表达、COX-2蛋白合成以及下游产物PGE2水平,旨在确定特异性阻断人滑膜成纤维细胞COX-2的siRNA。方法分离、培养和传代人类风湿关节炎(类风关)滑膜成纤维细胞。设计合成4条针对hCOX-2 mRNA siRNA(1#-4#siRNA),1条随机序列siRNA。设立1#-4#siRNA和随机序列siRNA组(NC)及未转染对照组(CTL组)。应用Lipofect AMINE2000将上述siRNA分别转染人滑膜成纤维细胞,4h后各培养孔加入终浓度为100nmol/L的佛波酯。转染36h、48h后,各组提取蛋白质和总RNA,应用RT-PCR检测hCOX-2 mRNA表达水平,通过Western Blot检测hCOX-2蛋白表达水平。采用ELISA方法检测各组上清液PGE2的水平。结果转染36h,PCR结果显示,CTL、NC、1#siRNA、2#RNA、3#RNA、4#siRNA、阳性对照HeLa细胞组hCOX-2 mRNA电泳条带密度值分别为1、0.72、0.3、0.25、0.4、0.04、2.1。WesternBlot结果提示上述各组hCOX-2蛋白密度值分别为1、1.04、0.52、0.39、0.9、0和2.48。转染48h后,各组hCOX-2蛋白条带密度值分别为0.05、0.52、0.51、0.9和0.15。转染24h、48h和72h后,4#siRNA组培养上清液PGE2的水平较其他各组低。结论4#siRNA能有效抑制人滑膜成纤维细胞COX-2 mRNA表达和COX-2蛋白的合成,且上清液中PGE2水平最低,证实4#siRNA能特异性阻断COX-2在滑膜成纤维细胞表达。

摘要：目的体外合成和筛选特异性阻断人滑膜成纤维细胞(RASF)环氧合酶-2(hCOX-2)的小分子干扰RNA(siRNA),同时了解COX-2抑制对炎症因子表达水平的影响。方法设计4条针对人COX-2 mRNA siRNA(1#～4#siRNA),1条随机序列作为对照。分成A～H组,A组为空白阴性对照,B～F组处理依次为随机siRNA、1#～4#siRNA。应用LipofectAMINE 2000将上述siRNA转染入RASF,各培养孔加入100 nmol/L的佛波酯。转染48h后,分别应用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和Western Blot检测hCOX-2 mRNA和蛋白表达水平。采用酶联免疫吸附(ELISA)方法检测各组上清液中前列腺素E_2(PGE_2)和白细胞介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α、血管内皮生长因子(VEGF)水平。结果4#siRNA转染的RASF表达hCOX-2 mRNA和蛋白水平明显低于其他siRNA干预组和阴性对照,且其上清液PGE_2和IL-1β、IL-6、TNF-α、VEGF水平较其他各组明显下降。结论4#siRNA能有效抑制COX-2 mRNA表达和COX-2蛋白的合成,且上清液中PGE_2和IL-1β、IL-6、TNF-α及VEGF水平最低。