摘要：根据GenBank中已发表的山羊SRY基因和β-乳球蛋白基因序列设计2对PCR引物,对来自3个1月龄山羊胎儿成纤维细胞的基因组DNA进行PCR扩增,分别以公羊、母羊的基因组DNA为阳性和阴性对照,同时对PCR产物进行序列测定和同源性分析。结果表明,阳性对照和GFF1细胞系有2条扩增带,阴性对照、GFF2和GFF3细胞系只有1条扩增带;序列测定结果表明,PCR扩增产物为SRY基因,利用该方法准确鉴定出1个雄性细胞系和2个雌性细胞系。

摘要：根据发表的犬瘟热病毒基因序列设计一对引物,利用PCR方法从重组质粒pcDNA-N中扩增到CDVNP保守区基因片段,并按预定的阅读框架插入表达质粒载体pGEX-6p-1中的谷胱苷肽转移酶(GST)基因的下游,获得重组质粒pNP-CDV并转化大肠杆菌BL21。序列测定表明,克隆到的基因片段大小为1065bp,与已发表的毒株核衣壳蛋白基因序列具有很高的同源性。通过对菌体裂解物的SDS-PAGE、Wester nblot鉴定以及IFA试验,证明携带重组质粒pNP-CDV的大肠杆菌的可以表达融合蛋白形式的核衣壳蛋白保守区域(命名为GST-NP,分子量约为64ku),该融合蛋白具有免疫原性和对CDV高免血清的反应活性。GST-NP的表达,将为临床检测CDV抗体提供诊断抗原。

摘要：根据Genbank犬瘟热病毒(CDV)毒株序列分别设计融合蛋白F和附着蛋白H全基因的2对引物,以2个CDV扬州分离株(CDV-YZ0101、CDV-YZ0102)为模板RT-PCR扩增出H基因和F基因2个片段,将其克隆进pGEM-Teasy载体,并进行序列分析。结果表明:H基因的开放阅读框架(ORF)为1 824 bp,2种分离株间核苷酸和编码氨基酸同源性达98％左右,与中国长春分离株、美国、日本分离株的同源性分别为96％、93％-95％和90％-91％。氨基酸分析显示扬州分离株与其他分离株的H蛋白有8-9个可能的天冬酰胺糖基化位点,而OP-CDV疫苗株只有4个类似位点。扬州分离株与长春分离株同属一个系,与美国、日本分离毒株以及疫苗株相比,均存在着明显的差异。F基因ORF为1 989 bp,不同毒株间的核苷酸及编码氨基酸差异主要表现在信号肽区域,而编码的F0前体蛋白表现出较高同源性(97％-99％),且所有的13个半胱氨酸残基、4个可能的天冬氨酰糖基化位点和2个疏水区域均完全一致。因此CDV F与H蛋白基因相比有很高的同源性,证明中国分离株与国外参考株有差异。

摘要：为了研究隐孢子虫感染对鸡细胞免疫功能的影响，设计了鸡异体皮肤移植试验。受试鸡为ＳＰＦ鸡，饲养于隔离器内。感染组１～３日龄感梁隐抱于虫，并于感染后４ｄ粪便检查隐孢子虫卵囊，证明感染成功。２０日龄时进行皮肤移植试验。手术切口在鸡腿内侧，盼关节下方。移植皮片不缝合，采用创可贴包扎固定。同体移植皮片９６％（２５／２６）被接受，异体移植皮片，对照组１００％（１３／１３）被排斥，而感染组５８．３％（７／１２）被排斥，从而建立了异体皮肤移植测定鸡细胞免疫的方法。