摘要：ＹＭＢＬ布筒式系列过滤机的研制安徽省粮油工业公司薛武军０前言油脂加工业使用过滤机主要有以下几个方面：预榨（机榨）毛油过滤、浸出混合油过滤、脱色油过滤、安全抛光过滤、冬化脱脂（蜡）过滤，ＹＭＢＬ布筒式系列过滤机就是针对以上各方面的要求设计的专用油脂过滤...

摘要：目的设计合成靶向NF-κB的哑铃形诱骗剂ODN,分析靶向NF-κB的哑铃形诱骗剂对NF-κB转录活性、多发性骨髓瘤细胞8266的生长及其分泌的IL-6的抑制效应。方法采用电泳迁移率变动分析(EMSA)体外检测诱骗剂ODN对NF-κB转录活性的抑制效应。将8266细胞随机分为传代培养的8266细胞组;诱骗剂ODN处理组及脂质体处理组。通过阳离子脂质体以2mg/L、4mg/L、8mg/L不同剂量诱骗剂ODN转染8266细胞。转染后8、12、18h,ELISA法检测8266细胞培养上清中IL-6的表达。用MTT比色检查诱骗剂ODN对IL-6刺激的8266细胞生长的影响。结果硫代磷酸的诱骗剂ODN在体外能有效地抑制NF-κB与其顺式元件的结合;2mg/L、4mg/L、8mg/L等不同浓度的脂质体-ODN复合物对8266细胞表达IL-6的抑制程度不同。脂质体-ODN复合物对8266细胞的生长及IL-6的活性均有抑制作用。结论靶向NF-κB的诱骗剂ODN在体外可抑制NF-κB的转录活性,从而抑制8266细胞的生长,降低瘤细胞中IL-6的表达。

摘要：目的构建复制缺陷型重组腺病毒介导短发夹RNA(shRNA)干扰组织因子(TF)在胰岛表达。方法设计并合成四对单链寡核苷酸(ss oligo),经变性退火为双链寡核苷酸(ds oligo)插入穿梭质粒pENTR/U6载体,测序正确后经脂质体介导入成人胰岛,通过实时定量RT-PCR方法筛选对TF沉默效果最佳穿梭质粒pENTR/U6-shRNA,然后与腺病毒骨架质粒行同源重组,筛选出正确重组子,用293A细胞包装出表达TF-shRNA的复制缺陷型重组腺病毒并测定其病毒滴度,通过实时定量RT-PCR腺病毒沉默TF效果予以检测。结果测序结果提示所构建的pENTR/U6-shRNA质粒正确,并从四对dsoligos筛选出对组织因子沉默效果最佳的穿梭质粒pENTR/U6-shRNA,经同源重组后成功构建了介导shRNA-TF复制缺陷型重组腺病毒。转染胰岛后,通过实时定量RT-PCR方法检测发现shRNA-TF腺病毒感染胰岛后对TF mRNA的沉默效果4d后达最佳效果,为54.29%(P<0.05vsNC)。结论成功构建的介导shRNA复制缺陷型重组腺病毒可以体外抑制胰岛细胞中组织因子的表达。

摘要：背景:能否获取到足够的具有生物活性的胰岛细胞是影响胰岛细胞移植成功与否的主要原因之一,细胞冻存是收集足够胰岛的可行手段,但冻存复苏过程可引起细胞的凋亡。目的:观察银杏叶提取物对大鼠胰岛获取及冻存后功能的影响。设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2007-10/12在西安交通大学医学院环境与疾病相关基因教育部重点实验室完成。材料:选用成年SD大鼠40只用于分离提取胰岛细胞。方法:按随机数字表法将40只大鼠分为2组(n=20),银杏叶提取物组取胰腺前经尾静脉注射银杏叶提取物25mg/kg,获取胰岛后冻存,复苏后分别在含银杏叶提取物的培养基中培养3,7,14,21d(n=5)。对照组尾静脉注射等量盐水,冻存、培养时间同银杏叶提取物组。主要观察指标:电镜下观察胰岛细胞形态;应用原位末端标记法检测细胞凋亡情况;以免疫组化法检测Bcl-2表达。结果:①银杏叶提取物组胰岛细胞复苏损失率明显低于对照组(P<0.05)。②与对照组相比,银杏叶提取物组胰岛细胞复苏培养3d时内分泌颗粒及酶原颗粒增多明显。③银杏叶提取物组复苏培养21d后胰岛细胞仍可保持45%左右的存活率,对照组胰岛细胞存活率﹤35%,两组比较差异具有显著性意义(P<0.05)。④复苏培养7,14d,银杏叶提取物组胰岛细胞凋亡率低于对照组(P<0.05),Bcl-2表达高于对照组(P<0.05)。结论:银杏叶提取物能够减少胰岛冻存复苏的损失,阻止胰岛细胞的凋亡,从而保护了胰岛细胞的活性。

摘要：目的探讨提高大鼠胰岛细胞产量和纯度的最佳分离纯化方法。方法40只大鼠分为4组,每组10只。A组:Hanks液灌注+胶原酶V消化+Ficoll400梯度纯化;B组:组织剪碎研磨+筛网过滤;C组:胶原酶V灌注+Ficoll400梯度纯化;D组:胶原酶V灌注+筛网过滤。对用四种不同方法分离纯化的结果进行比较。结果完全随机设计的方差分析显示,A、B、C、D组收获量及纯度比较均有显著性差异(P0.05);A组纯度与其他组比较均无显著性差异(P>0.05)。结论用胶原酶V或Hanks液灌注,Ficoll400梯度纯化法所收获胰岛细胞的产量和纯度较高,而且价格低廉,是一种较理想的胰岛细胞分离纯化方法。