摘要：旱草灵等对蒜地杂草的防效及安全性薛萍霞徐世杰侯耀国张葵芳施文忠（太仓市植保植检站２１５４００）（太仓陆渡农技站）为明确旱草灵等４种除草剂对蒜地杂草的防除效果及对大蒜的安全性，按江苏省农科院植保所“大蒜地杂草及防除技术研究”课题组的设计，于１９９２～１...

摘要：【目的】旨在克隆兔豆状囊尾蚴(Cysticercus pisiformis)半胱氨酸蛋白酶抑制剂(cysteine protease inhibitor)Stefin基因(CpStefin),原核表达并纯化兔豆状囊尾蚴半胱氨酸蛋白酶抑制剂CpStefin蛋白,制备多克隆抗体并测定其效价。【方法】根据GenBank登录的猪带绦虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂Stefin基因序列设计引物,以提取的兔豆状囊尾蚴总RNA为模板,运用RT-PCR方法克隆兔豆状囊尾蚴Stefin基因,构建克隆载体pMD-19TCpStefin,分析Cpstefin蛋白氨基酸序列的二级结构、理化性质、结构域,并分析其与其它绦虫Stefin基因的亲缘关系,构建系统进化树。以克隆载体pMD-19T-CpStefin为模板扩增兔豆状囊尾蚴Stefin基因,回收纯化的扩增产物连接到原核表达载体pGEX-4T-1,构建重组质粒pGEX-4T-CpStefin,双酶切、测序结果与预期结果一致。重组质粒pGEX-4T-CpStefin转化BL21(DE3)大肠杆菌感受态细胞,IPTG诱导表达获得重组蛋白。应用亲和层析法纯化可溶性CpStefin重组蛋白,进行SDS-PAGE鉴定。重组蛋白免疫家兔制备多克隆抗体,运用ELISA方法测定其效价。【结果】首次克隆兔豆状囊尾蚴半胱氨酸蛋白酶抑制剂CpStefin基因,基因大小约为290 bp,成功构建克隆载体pMD-19T-CpStefin;菌液PCR和双酶切鉴定结果表明重组质粒pGEX-4T-CpStefin构建正确,通过IPTG诱导表达获得分子质量大小约为35 kU的可溶性融合蛋白,亲和层析法纯化获得纯度较高的CpStefin重组蛋白,制备出的多克隆抗体效价达到1∶25600。【结论】本研究首次克隆出豆状囊尾蚴半胱氨酸蛋白酶抑制剂CpStefin基因,运用原核表达系统可溶性表达豆状囊尾蚴半胱氨酸蛋白酶抑制剂CpStefin蛋白,纯化获得纯度较高的豆状囊尾蚴半胱氨酸蛋白酶抑制剂CpStefin重组蛋白,制备的多克隆抗体效价达到1∶25600。

摘要：目的评价小儿金翘颗粒治疗儿童轻型流行性感冒风热证的疗效及其安全性。方法采用分层区组随机、阳性药平行对照、非劣效检验、多中心临床试验设计。计划纳入240例受试儿童,按1∶1比例随机分为治疗组和对照组。治疗组予小儿金翘颗粒,对照组予磷酸奥司他韦颗粒,疗程5天并随访2天。比较两组疾病临床痊愈时间,完全退热时间,CARIFS症状维度分与时间的曲线下面积,并发症、重症及危重症发生率,中医证候疗效(痊愈率)和安全性指标。结果共纳入临床诊断患儿240例,其中229例进入全分析数据集(FAS),200例进入符合方案数据集(PPS),233例进入安全性数据集(SS)。治疗后,主要指标疾病临床痊愈中位时间,治疗组与对照组均为3天,组间比较差异均无统计学意义(P>0.05),采用加速失效-对数正态模型,按0.75的非劣标准,治疗组非劣效于对照组,PPS与FAS分析结论一致。次要指标,治疗组和对照组的完全退热中位时间分别为42h、36h,组间比较,FAS分析差异有统计学意义(P0.05);CARIFS症状维度评分与时间曲线下面积,并发症、重症及危重症发生率,以及中医证候疗效(痊愈率)组间比较差异均无统计学意义(P>0.05)。治疗中,治疗组与对照组分别发现23例次、18例次不良事件。治疗组不良反应9例次、对照组10例次。不良事件与不良反应发生率的组间比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论小儿金翘颗粒治疗儿童轻型流行性感冒具有缩短病程作用,疗效非劣于磷酸奥司他韦颗粒,临床应用的安全性较好。