摘要：目的观察阻断MBD1基因对胰腺癌抑癌基因表达的影响，探讨MBD1基因在胰腺癌发生发展中的作用。方法设计并合成2条MBD1小干扰RNA（siRNA）序列，克隆进入pGCsi—U6／Neo/绿色荧光蛋白（GFP）构建重组质粒。重组质粒和空质粒转染人胰腺癌细胞系BxPC-3，将3组细胞（转染MBD1-siRNA重组质粒组、转染空质粒组和未转染组）接种于裸鼠，8周后取移植瘤行逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测MBD1基因和甲基化相关抑癌基因的表达情况。结果成功构建MBD1-siRNA重组质粒并稳定转染胰腺癌细胞系BxPC-3，转染组中MBD1基因表达明显低于空质粒组和未转染组，而CDH1、RASSF1A、TIMP3、P14ARF、Rb等甲基化相关抑癌基因的mRNA水平转染组（179．7±8．1、155．6±10．0、256．7±15．7、199．0±7．9、210．1±9．4）要高于空质粒组（21．0±6．8、22．0±2．7、99．4±10．3、86．0±5．4、15．0±4．9）和未转染组（11．4±6．0、15．3±1．9、110．7±14．1、74．3±4．8、17．4±7．8，均P〈0．05）。结论通过RNA干扰技术，可降低MBD1在胰腺癌中的表达，上调抑癌基因的转录，MBD1介导的转录抑制作用可能在胰腺癌的发生发展中起重要作用。

摘要：目的:观察下调甲基化CpG结合域蛋白1(MBD1)表达后对胰腺癌细胞甲基化相关基因VIMENTIN、GRP78表达的影响,探讨MBD1介导的甲基化调控网络在胰腺癌发生、发展中的重要作用。方法:人工设计合成针对MBD1基因的小分子干扰RNA,构建MBD1-siRNA重组质粒,脂质体法转染人胰腺癌细胞株BxPC-3,RT-PCR和Western印迹法检测转染前后MBD1、VIMENTIN和GRP78mRNA与蛋白表达的变化。结果:MBD1-siRNA重组质粒成功转染胰腺癌细胞系BxPC-3,并筛选得到稳定表达的细胞株。转染后胰腺癌BxPC-3细胞株MBD1、VIMENTIN和GRP78的mRNA与蛋白表达水平均明显降低。结论:MBD1下调可使胰腺癌细胞VIMENTIN和GRP78表达下降;MBD1可能通过调控甲基化相关基因的表达,在胰腺癌的发生、发展过程中起重要的作用。