摘要：以飞鱼籽为原料,鱼籽脱囊衣率为指标,从胰蛋白酶、胶原蛋白酶、碱性蛋白酶和木瓜蛋白酶4种酶中,筛选出胰蛋白酶为最佳使用酶,并采用L9(34)正交实验设计对胰蛋白酶脱除飞鱼籽囊衣工艺参数进行优化。结果表明,酶解液浓度0.8mg/mL、pH9、在20℃下酶解12min,飞鱼籽脱囊衣率可达83%以上。

摘要：【目的】探索在慢羽鸡成纤维细胞中敲除ev21基因的可行性,净化鸡群内源性逆转录病毒,同时为快速培育缺失ev21基因的慢羽鸡配套系打下基础。【方法】根据ev21基因序列(KY235336)特点,分别在其5’和3’端各设计2个sgRNA,用于构建4种不同sgRNA的打靶质粒,筛选出在5’和3’端打靶效率较高的sgRNA。然后基于CRISPR/Cas9基因编辑技术对ev21基因进行剪切,并通过同源重组方式以红色荧光蛋白(mCherry)的DNA片段(CAG-mCherry)替换ev21基因,实现对慢羽鸡成纤维细胞内源性白血病病毒ev21基因定点敲除。【结果】在慢羽鸡成纤维细胞中能检测到ev21基因,构建的4种sgRNA(sgRNA1~sgRNA4)均能成功插入对应的打靶质粒中,经嘌呤霉素筛选及T7E1酶切检测,发现转染4种不同sgRNA打靶质粒后慢羽鸡成纤维细胞均有不同程度的死亡,其中又以sgRNA1和sgRNA3的基因敲除效率较高。同时针对同源位点左右同源臂构建表达mCherry的供体质粒,以其转染293T细胞12 h后均能表达出mCherry。以sgRNA1和sgRNA3打靶质粒及供体质粒共同转染慢羽鸡成纤维细胞,观察发现成纤维细胞内的mCherry持续表达,至转染后第30 d通过流式细胞仪分选收集红色荧光阳性成纤维细胞,并提取其总DNA进行PCR鉴定与基因测序,结果显示红色荧光阳性成纤维细胞中有目的片段(CAG-mCherry)插入,即以插入替换方式能实现对ev21基因的敲除。【结论】基于crispr/cas9基因编辑技术的基因敲除方法能成功敲除慢羽鸡成纤维细胞内源性白血病病毒ev21基因,为培育缺失ev21基因的慢羽鸡品系提供技术支持。

摘要：针对永平铜矿进入深部开采后废石运距远、运输系统不合理等问题，进行了系统分析，提出了在当前技术经济条件下的废石运输方案，技术、经济效益显著。

摘要：提出了一种新型2T1R并联机构,其动平台与PRR支链中的转动副、PUS支链中的球面副相连,通过3条支链中移动副的直线位移输入进行驱动。基于螺旋理论验证了该机构自由度的数目及类型,用解析法对机构进行了位置反解计算。对机构的速度特性进行分析,得出了机构的Jacobian矩阵,并利用该矩阵对机构的奇异性进行了分析。通过数值离散搜索法确定了动平台的可达位置工作空间,分析了各运动支链长度对可达位置工作空间的影响,研究了可达位置工作空间内动平台的最大转动角度特性。通过粒子群优化算法,对机构进行了尺度优化设计。

摘要：天津世纪钟作为天津的城市标签,蕴含着新的责任和意义。本文介绍了世纪钟的具体构造、结构特色、设计原理,着重强调了世纪钟与天津近代工业的关系,象征海河孕育天津人民的贡献,与天津站的关联性,从时间角度对天津居民的影响,并基于世纪钟的特性对天津市的发展提出了更高的期望。