摘要：目的:建立快速、准确的鉴定阿根廷滑柔鱼及其混淆品科氏滑柔鱼的DNA分子标记方法。方法:提取阿根廷滑柔鱼及科氏滑柔鱼的基因组DNA,利用PCR扩增2种鱿鱼品种的细胞色素C氧化酶亚基I(Cytochrome Oxidase Subunit I,COI)的核苷酸序列,利用序列比对发掘2种鱿鱼的品种特异性位点。根据2种鱿鱼品种的SNP位点,通过引入错配碱基设计品种特异性引物,并建立鉴定2种鱿鱼品种的多重PCR体系。结果:建立的多重PCR反应体系使阿根廷滑柔鱼扩增出了516 bp的特异性条带,科氏滑柔鱼产生了419 bp的特异性条带,2种鱿鱼的混合品则同时扩增出了516 bp和419 bp的条带。结论:利用SNP分子标记建立的多重PCR体系,快速、准确、特异性强,可作为阿根廷滑柔鱼及其加工产品原料来源鉴定的分子手段。

摘要：目的:开发一种能够准确鉴别山豆根药材的DNA分子标记方法,以保障山豆根临床用药的安全性和有效性。方法:在核糖体内转录间隔区挖掘山豆根及其混伪品的DNA多态性序列,分别设计山豆根及其混伪品的物种特异性引物,建立可用于区分山豆根及其5种混伪品的多重PCR体系。结果:该多重PCR体系不仅可以在一次反应中准确地实现山豆根及其5种混伪品的分子区别和鉴定,而且还可以检测山豆根中1%的掺伪品,DNA检测限低至0.1 ng。结论:与传统的性状鉴别、显微鉴别及理化鉴别方法相比,该研究所建立的山豆根DNA分子标记鉴定方法稳定性好、准确度高、特异性强,可以有效地解决市场上山豆根药材的植物来源复杂、混伪品难以鉴别的问题。

摘要：利用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)技术扩增新西兰柔鱼和北太平洋柔鱼的线粒体细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ(cytochrome C oxidase subunitⅠ,COⅠ)基因,通过多重序列比对检测2种鱿鱼之间的多态性位点。根据2种鱿鱼的特异性位点分别设计2种鱿鱼的品种特异性引物,并利用多重PCR实现2种鱿鱼品种的特异性鉴定和区分。结果表明:建立的品种特异性PCR鉴别体系对新西兰柔鱼和北太平洋柔鱼分别扩增出214 bp和339 bp的品种特异性条带,该方法的检测限低至0.1 ng,且能检测出新西兰柔鱼中1%的北太平洋柔鱼掺入,并能有效检测市场上2种鱿鱼及其复配鱼糜制品的原料来源。