摘要：背景:神经营养素3是目前发现的在脊髓损伤修复中作用最强的神经营养因子,它能有效促进再生轴突穿越胶质瘢痕组织,从而修复脊髓损伤。目的:构建含有人神经营养素3基因的重组慢病毒载体(LV-hNT3),观察转染后人神经营养素3基因在许旺细胞中的表达。设计、时间及地点:观察性实验,于2007-06/2008-03在长海医院中心实验室完成。材料:取新生3d的SD乳鼠双侧坐骨神经,用于许旺细胞的培养及鉴定;慢病毒三质粒系统pGC-E1-EGFP,pHelper1.0和pHelper2.0为上海吉凯基因化学技术有限公司产品。方法:通过双限制性内切酶消化和连接的方法构建pGC-E1-hNT3-EGFP质粒,接着该质粒转化感受态的大肠杆菌***5α,通过PCR及基因测序鉴定阳性克隆,再经Lipofectamine2000将pGC-E1-hNT3-EGFP,pHelper1.0和pHelper2.0三质粒系统共转染293T细胞包装病毒,按照病毒感染复数=1,4,8,10,12加入预先混好重组病毒完全培养液2mL,通过增强型绿色荧光蛋白的表达测定收集的病毒滴度。将慢病毒转染许旺细胞,以未经转染的许旺细胞和经空载的慢病毒转染的许旺细胞为对照组。主要观察指标:慢病毒转染许旺细胞后,检测转染效率,通过实时荧光聚合酶链反应和蛋白免疫印迹检测人神经营养素3在许旺细胞中的表达。结果:实验中重组质粒的外源基因序列与GeneBank中的人神经营养素3阅读框架序列完全一致;浓缩后病毒滴度为5×107TU/L,LV-hNT3感染许旺细胞后,许旺细胞发出明亮的绿色荧光,当感染复数=10时转染效率最高达85%,实时荧光PCR检测表明人神经营养素3mRNA在人神经营养素3-许旺细胞中高效表达,而对照组中未表达,蛋白免疫印迹证实人神经营养素3在许旺细胞中表达。结论:实验构建的含有人神经营养素3基因的慢病毒载体能感染许旺细胞并且高效表达人神经营养素3。

摘要：背景:脊髓损伤后,由于有胶质瘢痕的阻隔,使再生的轴突难以穿越损伤区域,从而影响脊髓功能的恢复。随着组织工程技术的发展,研究人员尝试利用在三维支架的空间诱导作用下,让再生的轴突和支架内部携带的细胞能够三维有序的生长,穿越瘢痕屏障,连接脊髓损伤断端。目的:采用编织工艺研制新型以聚乙交酯-丙交酯为原料的三维支架,检测新型支架与许旺细胞的生物相容性。设计、时间及地点:体外对比观察实验,于2007-06/2008-03在长海医院中心实验室完成。材料:选择聚乳酸︰聚羟基乙酸为9︰1的聚合材料聚乙交酯-丙交酯,通过熔融纺丝、拉伸、编织等步骤制作聚乙交酯-丙交酯三维支架。取新生3dSD乳鼠的坐骨神经,分离、纯化许旺细胞。方法:实验分3组:三维支架组将许旺细胞接种在新型三维支架内培养;明胶海绵组将许旺细胞接种在胶原海绵上培养;细胞培养皿组直接接种在预涂左旋多聚赖氨酸的24孔培养板上培养。主要观察指标:扫描电镜观察内部微管道的排列规律,测量其孔径大小、孔隙率等指标。通过倒置相差显微镜和扫描电镜观察许旺细胞在支架上生长情况,包括许旺细胞在支架上的黏附、增殖和凋亡情况等。结果:支架外径为3mm,微管道内径为100μm,呈均匀平行排列,支架的孔隙率为68%。三维支架组与细胞培养皿组中的许旺细胞黏附、增殖差异无显著性意义,与明胶海绵组差异有显著性意义。三维支架组与明胶海绵组中细胞凋亡差异无显著性意义,它们均低于细胞培养皿组,差异有显著性意义。结论:新型三维编织型支架具有良好的生物相容性。

摘要：目的通过获取骨骼标本中腰椎后柱结构的相关解剖参数以及健康人腰椎后柱的三维构象样本数据，设计腰椎棘板螺钉动态内固定系统。方法对20具L3～S1，段骨骼标本行层次解剖，使用游标卡尺测量椎板区域的厚度以获取腰椎棘板的相关解剖参数；另对20名健康成人腰椎的L3-S1，段行三维CT重建扫描，以获取腰椎后部结构三维空间构象样本数据。结果通过解剖观察与测量，棘板螺钉固定置钉区域拟设定在腰椎椎板内侧的中1／3处，椎板L3-4。段厚度（6．6±0．9）mm，L，-S1段厚度（6．0±0．6）mm。长度6．5—8．0mm的棘板螺钉符合双侧皮质骨螺钉固定的要求。结论可选择下腰椎棘突椎板区域为双侧皮质骨螺钉固定区域，椎板螺钉长度6．5—8.0mm即可。

摘要：目的：探讨改良型股骨假体应用于初次后稳定型全膝关节置换术的疗效.方法：2012年4月1日至2013年1月1日,因膝关节骨性关节炎入院,由同一位主任医生完成的初次后稳定型全膝关置换术病例,共156例.61例使用改良型股骨假体,男7例,女54例,平均年龄（68.34±5.41）岁;95例使用普通股骨假体,男14例,女81例,平均年龄（69.92±5.11）岁.观察并记录156例患者的性别、年龄、体重指数、Insall-Salvati指数、假体型号、髌骨弹响综合征发生率、术后下肢力线及术后膝关节活动度.平均随访45.31周（36～56周）,记录每例患者随访时的美国膝关节协会评分（AKS评分）.结果：改良型股骨假体组髌骨弹响综合征发生率为0,低于普通股骨假体组的11.48％,且术后膝关节活动度（110.98±10.32）°,优于普通股骨假体组（107.05±8.61）°.术后随访4次,在术后21～28 d改良型股骨假体组膝关节评分129.79±9.63,优于普通股骨假体组126.85±7.79.结论：采用改良设计的新型股骨假体能降低髌骨弹响综合征发生率,并获得更好的早期膝关节功能恢复.