摘要：临床微生物学与检验实验课中临床常见细菌检验是最重要的内容,检验科临床微生物室的工作重点也是临床常见细菌检验,笔者结合检验科临床实际,对临床常见细菌检验实验课教学进行改革[1-2],共设计3个基本技能培训专题[3-4]和4个综合性设计性实验专题[5-6].

摘要：目的通过构建携带人组织因子基因的RNAi慢病毒载体,获得可供转染的滴度,为下一步研究该基因缺陷在真核细胞中的影响提供物质基础。方法根据人组织因子基因设计的2条互补的单链寡核苷酸退火后形成双链,插入到pENTR^(TM)/U6载体的粘性末端.生成含RNAi盒的pENTR/U6载体,测序;与目标载体pLenti6/BLOCK-iT^(TM)-DEST vector进行位点特异性重组,再测序;经脂质体导入293FT细胞,包装成慢病毒,收集病毒上清并采用系列稀释法测定病毒滴度。结果经测序分析证实pENTR^(TM)/U6-TF-shRNA为阳性克隆,与载体pLenti6/BLOCK-iT^(TM)-DEST vector重组后测序结果显示也为阳性克隆,包装病毒,病毒悬液的滴度为5×10~5TU/mL。结论成功构建了携带人组织因子(TF)基因的RNAi慢病毒载体,为血栓栓塞性疾病的防治提供了新的思路。

摘要：对临床微生物学检验理论课、实验课和实习进行系列教学改革:理论课教学改革,进行多媒体素材库建设,编写检验医学生物安全知识培训手册,每位教员首次讲授的理论课,均进行集体备课及试讲;实验课教学改革,设计3个基本技能培训专题、4个综合性设计性实验专题、4次见习课,依托检验医学系"本科生临床检验诊断学创新基地"开展课外科研活动;实习教学改革,编写实习生培训手册,对实习生考核方式进行改革,开展医院感染监测和循证检验医学研究方向,指导本科生完成毕业论文。

摘要：目的:利用慢病毒载体沉默小鼠骨髓树突状细胞(DC)的RelB基因,建立RelB基因低表达的骨髓致耐受DC,为自身免疫病的防治提供新方法。方法:设计小鼠RelB基因干扰的靶序列R5,合成并克隆到慢病毒载体上,与慢病毒的包装材料在293FT细胞中包装成病毒颗粒,收集病毒上清,测定病毒滴度,然后包装慢病毒感染DC,RT-PCR和免疫荧光方法检测,灰度扫描并用软件分析RelB基因的表达水平,未成熟DC作对照组,选择T6包装病毒为RNAi的阴性对照。结果:RT-PCR和免疫荧光方法发现R5病毒感染的DCRelB基因表达水平与未成熟DC基因表达水平接近,低于成熟DC的表达水平(P<0.05),而实验对照T6组病毒感染的DC其RelB基因表达水平高于未成熟DC(P<0.05)和R5病毒转染DC组(P<0.05)。结论:小鼠骨髓DC表达的RelB基因被慢病毒载体有效沉默,有望成为DC免疫治疗的新载体。

摘要：目的构建小鼠RelB基因RNA干扰(RNAi)慢病毒载体,有效沉默骨髓树突细胞(DC)的RelB基因表达,为构建骨髓致耐受DC用于自身免疫病的防治提供研究基础。方法利用Invitrogen公司在线软件设计小鼠RelB基因(NM_009046)shRNA序列,合成、退火形成dsoligo后克隆到pENTRTM/U6载体的黏性末端,测序,得到的阳性重组子再与慢病毒载体进行重组,转化stb13感受态细胞,测序鉴定,在脂质体的介导下将慢病毒的包装混合物和RelB基因重组慢病毒载体导入293FT细胞,包装成病毒后,收集病毒上清,采用系列稀释法测定病毒滴度。结果测序结果显示pENTRTM/U6-RelB-shRNA为阳性克隆,将该阳性重组载体与慢病毒载体重组,转化,氨苄青霉素抗性筛选阳性克隆,U6前引物测序鉴定,测序结果显示该重组慢病毒载体也为阳性克隆,在293FT细胞中进行病毒包装,收集上清并在-80℃贮存。系列稀释法检测病毒悬液的滴度为6×105TU/ml。结论成功构建出小鼠RelB基因shRNA慢病毒RNAi表达载体,为制备致耐受DC和研究DC在自身免疫病中的应用提供了稳定的转染细胞载体。

摘要：医学虚拟仿真教学环境是虚拟仿真技术和医学教学训练的高级、复杂结合，是信息化教学的高级应用，一直是国内学者关注和研究的热点。根据医学检验的教学特点，南方医科大学医学检验系设计了一套医学虚拟仿真教学环境的架构，建立了虚拟仿真实验教学中心，将各个虚拟仿真软件及工具软件在实验教学中充分应用。实践表明，此仿真教学环境具有安全无风险、高效率、学习体验真实、应用前景广阔等优点。其在一定程度上克服了实践操作条件对课程实施的限制，极大提高了课程教学效果。

摘要：背景:异体手移植已经从实验室走向临床。目的:探讨异体双手移植中共刺激信号动态监测的临床意义。设计:病例-对照观察。单位:南方医科大学南方医院创伤骨科。对象:于2001-09/12选取南方医科大学南方医院创伤骨科收治的异体双手移植患者1例,并选择15例健康成人为对照组。方法:患者术前未用免疫抑制剂采血1次;术前使用免疫抑制剂后采血2次;术中接动静脉前各采血1次;术后第1周每日采血1次,第2周隔日采血1次,三,四周每周两次,后每周1次共2个月。其中术后1周为诱导期,余为维持期。对照组健康成人抽取外周静脉血2mL,20g/L乙二胺四乙酸抗凝,应用流式细胞仪动态监测T细胞表面共刺激分子(CD28,CD54,CD11a)变化。主要观察指标:移植前后T淋巴细胞表面共刺激分子的变化。结果:异体双手移植患者的3种共刺激分子(CD28,CD54,CD11a)变化一致,诱导期较术前下降[(9.84±5.28)%,(55.50±3.62)%;(71.03±5.33)%,(95.10±1.26)%;(9.40±9.17)%,(29.70±3.23)%],维持期维持于较低水平[(22.54±6.56)%,(91.28±8.12)%,(11.22±4.08)%]。结论:动态监测异体肢体移植患者外周血中共刺激信号可以帮助观察肢体移植术后患者的免疫反应强度,对于指导免疫抑制药物的应用以及预测和诊断排斥反应具有重要参考价值。同时,通过处理共刺激信号的方法诱导免疫耐受在异体手移植中具有一定的应用前景。