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比较单管和双管SYBR Green荧光定量PCR方法在端粒长度测量中的应用: 收藏
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引用; 《生物医学》2022年第2期12卷 103-108页; 作者：王淑一裘振亚杭州艾迪康医学检验中心有限公司浙江杭州; 目的:探讨单色多重定量PCR方法在人类端粒长度测量中的临床应用价值。方法:我们设计了针对端粒基因多次重复序列的能产生固定长度产物的引物,同时设计能扩增单拷贝基因的引物作为内参;两对引物在同一管中进行SYBR green QPCR反应,数据...; 目的:探讨单色多重定量PCR方法在人类端粒长度测量中的临床应用价值。方法:我们设计了针对端粒基因多次重复序列的能产生固定长度产物的引物,同时设计能扩增单拷贝基因的引物作为内参;两对引物在同一管中进行SYBR green QPCR反应,数据进行分析获得端粒相对长度。结果:1) 两对引物在单管中反应没有改变单独反应时的扩增效率和溶解温度;2) 同一样本在单管内和双管内反应T/S的差异很大;3)通过对同一样本进行10次重复发现,单管的值很均一,而双管的值相差很大,CV%分别是15.25%和53%。结论:我们的结果提示,单色单管方法准确性和重复性都大大优于单色双管,能够准确测量端粒的相对长度,有利于在生物医疗研究领域中的应用。; 来源：详细信息评论

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